电泳实验技术原理

电泳实验的技术原理

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电泳是带电颗粒在电场作用下，向着与其电荷相反的电极移动的现象。因此，每个核苷酸携带一个净负电荷，即，一个核酸分子的总电荷与核苷酸的总数或它的质量成正比。在一定pH条件下，每一种分子都具有特定的电荷（种类和数量）、大小和形状，在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同，各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理。

带电颗粒在电场中泳动的速度称迁移率或泳动度。

电泳时，带电颗粒（球形）在介质中受力平衡匀速运动，则有：

v = F阻/f = FE/f = E·q/f = E·q/(6π·r·η)

v — 泳动度 F阻 — 颗粒所受阻力

E — 电场强度 q — 颗粒所带电荷

r — 颗粒半径 η — 介质黏度

FE — 颗粒所受电场力 f — 摩擦系数

由上式可见：泳动度与球形分子半径、介质粘度、颗粒所带电荷以及电场强度有关。 非球形分子（如线状DNA）在电泳过程中受到更大的阻力，即粒子的泳动度与粒子形状有关。

核酸电泳凝胶的摄影与净化处理

核酸电泳凝胶的摄影与净化处理

1.凝胶摄影

需配置分辨率较高的照相机，照相机固定架，近摄镜和红色滤光镜以及有机玻璃防护面罩。

操作需在暗室进行，将相机固定好，把凝胶放在紫外检测仪上适当位置，调焦，装上红色滤光片，按常规拍照。

亦可使用凝胶自动处理系统，但仪器费用较高。

2.EB溶液的净化处理

由于EB具有一定的毒性，实验结束后，应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害***健康。

(1) 对于EB含量大于0.5μg/ml的溶液，可如下处理:

①将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5μg/ml;

②加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4 ，混匀，再加入等量的25mol/L HCl，混匀，置室温数小时;

③加入一倍体积的2.5mol/L NaOH，混匀并废弃。

(2) EB含量小于0.5μg/ml的溶液可如下处理:

① 按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时;

② 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。

LF-31DS型 水平琼脂糖电泳槽

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技术参数：

电极铂金丝直径为0.26mm，纯度为99.95%，电场强大、稳定；

凝胶板规格(L×W)：60×60mm；120×60mm(宽胶)；

60×120mm(长胶)；120×120mm;

样品梳：11 25齿(1.0mm厚)；6 13齿,8 18齿(1.5mm厚)；

2 3齿(2.0mm厚) ;

缓冲液总容量：约650ml

产品用途：适用于分离、制备DNA、RNA。