蛋白电泳槽
电泳槽简介
龙方科技——生命科学实验室专用的电泳槽供应商,我们为您带来以下信息.
电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分,生命科学电泳实验技术的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据蛋白电泳的原理,凝胶都是放在两个缓冲腔之间,电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之间的接触可以是直接的液体接触,也可以间接通过凝胶条或滤纸条。垂直蛋白电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场,但在装置设计上有一些困难,如液体泄漏,用电安全和操作麻烦等问题.
垂直电泳槽漏液的原因
电泳槽密封条漏液的原因与处理(垂直槽)
一般情况下,电泳槽较窄的密封条不易漏夜,反之较宽的则比较容易漏,发现电泳槽漏液时要检查:
1、密封条是否老化或损坏,若已经老化或损坏,应更换密封条。
2、如果密封条完好无损,目测检查密封条是否有凹凸不平现象,如果有应将密封条拆下进行重新安装。安装时注意不要拉扯密封条,使其自然地嵌入密封槽内,并保证安装均匀,避免密封条出现凹凸现象。
3、如果缓冲液是从密封条的中间漏出,则说明漏处比两边凹(不在同一水平线上),我们则需要把密封条拆下,清理干净槽内胶粘剂,然后再将薄厚相当的窄边条(如0.4毫米)粘在槽内,以垫起凹下的密封条,使其与两边保持一致,此后再将密封条粘在槽内即可。
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转印电泳的一抗和二抗
转印电泳的一抗和二抗
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一抗孵育:将LG用稀释液稀释到适当的浓,在摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜5 X 5min,如果预实验中发现背景过高,可以增加洗膜时间或洗膜次数
二抗孵育:二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG, 摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可适当降低延长二抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜3 X 10min
T:Tween-20(去污剂)
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