电泳槽配置
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电泳槽一般分为三部分:1,电泳槽外壳;2,电泳槽主体;3,电泳槽附件。电泳槽外壳一般使用进口的优质PC料,透明度高,耐高温,便于观察。电泳槽主体是电泳槽的核心部分,用来承载电泳凝胶,转印电泳槽,形成含有正负极的直流电场,从而能让样品在凝胶内分成电泳条带,终实现样品的电泳分离。电泳槽附件主要有:凝胶玻璃板、加样梳、制胶器、凝胶托盘、电泳槽导线等,从用途和样品性质来说,电泳槽主要分为:蛋白电泳槽、蛋白转印电泳槽和核酸电泳槽三大类别。
DNA电泳技术原理
根据DNA分子量不同,蛋白电泳槽,采用外加电场使其分开,用EB嵌入DNA分子后在紫外下显色。
琼脂糖凝胶电泳是利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。
1) 在电场的作用下及中性pH的缓冲条件下,带负电的核酸分子向正极迁移。由于糖一磷酸骨架在结构上的重复性质,水平核酸电泳槽,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极方向移动。
2) 在一定的电场强度下,电泳槽,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分子本身的大小和构型。具有不同的相对分子质量和不同构型的DNA片段泳动速度不一样,可进行分离。
3) ***化乙锭在紫外光照射下能发射荧光,当DNA样品在琼脂糖凝胶中从负极向正极泳动时,***化乙锭从正极向负极移动,这样***化乙锭分子就会嵌入DNA分子中形成络合物,使DNA在紫外光下发射很强的荧光。在***化乙锭足够的情况下,荧光的强度正比于DNA的含量,这样就可以检测DNA的浓度。
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电泳槽密封条漏液的原因与处理(垂直槽)
一般情况下,电泳槽较窄的密封条不易漏夜,反之较宽的则比较容易漏,发现电泳槽漏液时要检查:
1、密封条是否老化或损坏,若已经老化或损坏,应更换密封条。
2、如果密封条完好无损,目测检查密封条是否有凹凸不平现象,如果有应将密封条拆下进行重新安装。安装时注意不要拉扯密封条,使其自然地嵌入密封槽内,并保证安装均匀,避免密封条出现凹凸现象。
3、如果缓冲液是从密封条的中间漏出,则说明漏处比两边凹(不在同一水平线上),我们则需要把密封条拆下,清理干净槽内胶粘剂,然后再将薄厚相当的窄边条(如0.4毫米)粘在槽内,以垫起凹下的密封条,使其与两边保持一致,此后再将密封条粘在槽内即可。
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