蛋白电泳槽
电泳槽简介
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电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分,生命科学电泳实验技术的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据蛋白电泳的原理,凝胶都是放在两个缓冲腔之间,电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之间的接触可以是直接的液体接触,也可以间接通过凝胶条或滤纸条。垂直蛋白电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场,但在装置设计上有一些困难,如液体泄漏,用电安全和操作麻烦等问题.
电泳槽配置
电泳槽配置
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电泳槽一般分为三部分:1,电泳槽外壳;2,电泳槽主体;3,电泳槽附件。电泳槽外壳一般使用进口的优质PC料,透明度高,耐高温,便于观察。电泳槽主体是电泳槽的核心部分,用来承载电泳凝胶,形成含有正负极的直流电场,从而能让样品在凝胶内分成电泳条带,终实现样品的电泳分离。电泳槽附件主要有:凝胶玻璃板、加样梳、制胶器、凝胶托盘、电泳槽导线等,从用途和样品性质来说,电泳槽主要分为:蛋白电泳槽、蛋白转印电泳槽和核酸电泳槽三大类别。
转印电泳(湿转)实验的操作
转印电泳湿转方式的操作介绍
湿转(一般是恒压转印,100V,时间2h左右):转印缓冲液,三明治结构 ,底层海绵,往上依次是3-4层滤纸,凝胶,膜,3-4层滤纸,海绵
海绵和滤纸在使用前要用转移液浸泡,在制作三明治结构时一定要避免凝胶干燥,滤纸内的气泡要用玻璃棒赶走
膜在用之前都要活化,PVDF膜要先浸泡5S-30s,然后在转移缓冲液中平衡,目的是活化膜上的正电基团,NC膜直接在转移液中平衡即可
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