垂直电泳槽漏液的原因

电泳槽密封条漏液的原因与处理（垂直槽）

一般情况下，电泳槽较窄的密封条不易漏夜，反之较宽的则比较容易漏，发现电泳槽漏液时要检查：

1、密封条是否老化或损坏，若已经老化或损坏，应更换密封条。

2、如果密封条完好无损，目测检查密封条是否有凹凸不平现象，如果有应将密封条拆下进行重新安装。安装时注意不要拉扯密封条，使其自然地嵌入密封槽内，并保证安装均匀，避免密封条出现凹凸现象。

3、如果缓冲液是从密封条的中间漏出，则说明漏处比两边凹（不在同一水平线上），我们则需要把密封条拆下，清理干净槽内胶粘剂，然后再将薄厚相当的窄边条（如0.4毫米）粘在槽内，以垫起凹下的密封条，使其与两边保持一致，此后再将密封条粘在槽内即可。

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DNA电泳

DNA电泳常见问题分析及解决方案

DNA条带模糊：1，DNA降解避免核酸酶污染；2，电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液；3，所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃；巨大DNA链电泳，温度应＜15℃；核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力；4， DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量；5，DNA样含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐；6，有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白；7，DNA变性电泳前勿加热，用20mM N***缓冲液稀释DNA

不规则DNA条带迁移：1， 对于λ/Hind III片段cos位点复性电泳前于65℃加热DNA 5分钟，然后在冰上冷却5分钟；2，电泳条件不合适电泳电压不超过20V/cm；温度＜30℃；经常更换电泳缓冲液；3，DNA变性以20mM N*** Buffer稀释DNA，电泳前勿加热

带弱或无DNA条带：1，DNA的上样量不够增加DNA的上样量；聚酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高，上样量可适当降低；2， DNA降解避免DNA的核酸酶污染；3，DNA走出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；4，对于EB染色的DNA，所用光源不合适应用短波长（254nm）的紫外光源

DNA带缺失：1，小DNA带走出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；2，分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度；3， DNA 变性电泳前请勿高温加热DNA链，以20mM N*** Buffer稀释DNA；4，DNA链巨大，常规凝胶电泳不合适 在脉冲凝胶电泳上分析

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蛋白电泳

蛋白电泳样品的浓缩效应

1：凝胶孔径的不连续性：

浓缩胶为大孔胶；分离胶为小孔胶。在电场作用下，样品颗粒在

大孔胶中泳动的阻力小，移动速度快；当进入小孔胶时，受到的阻

力大，移动速度减慢。因而在两层凝胶交界处，样品迁移受阻而压

缩成很窄的区带。

2： 电位梯度的不连续性：

电泳开始后，快离子的快速移动会在其后形成一个离子强度很低 的低电导区，使局部电位梯度增加，将蛋白质浓缩成狭窄的区带

大多数蛋白质在pH6.7或8.3时均带负电荷，在电场中，都向正极移动。

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