epicentre*** Q***1250 Q-Beta Replicase
epicentre***Q***1250Q-BetaReplicase产品简介:北京中北林格供应epicentre***Q***1250Q-BetaReplicase,中北林格是epicentre***,提供epicentre产品货号报价查询。其他包括lucigen***,cellscript***,Biosearchtechnologies***,epicentre***,illumina***,ICLLAB***,ImmunoReagents***。</p>epicentre***Q***1250Q-BetaReplicase产品说明书应用方面Q-Beta***酶(QβReplicase)是一种RNA定向的RNA聚合酶,负责***噬菌体Q-BetaRNA***组。Blumenthal和Carmichael在一篇评论中介绍了酶的各个方面。1它由四个亚基组成,其中一个由Q-β噬菌体编码,三个由大肠***宿主编码。EPICENTRE的Q-Beta***酶是从大肠***中纯化的,其中含有表达噬菌体编码亚基的质粒。所有四个酶亚基均等比例存在(图1)。Q-BetaReplicase(QβReplicase)isanRNA-directedRNApolymerasethatisresp***ibleforreplicationofthecoliphageQ-BetaRNAgenome.VariousaspectsoftheenzymearepresentedinareviewbyBlumenthalandCarmichael.1Itiscomposedoffoursubunits,oneofwhichisencodedbytheQ-BetaphageandthreebytheE.colihost.EPICENTRE'sQ-BetaReplicaseispurifiedfromE.colicontainingapla***idthatexpressesthephage-encodedsubunit.Allfourenzymesubunitsarepresentinequalproporti***(Fig.1).在体外,Q-Beta***酶可以利用Q-Beta噬菌体RNA以外的其他RNA分子作为模板。这些包括在Q-β***酶反应中发现的各种亚***组变异RNA分子,例如中变(MDV)RNA和其他较小的变异RNA。另外,它也可以使用其他“非天然”模板,例如聚(rC),带有寡核糖核苷酸的RNA或带有多个C残基的RNA。Q-Beta***酶也可以***由包埋在中等变数MDV-1RNA中的RNA序列组成的重组RNA分子。2该酶使用MDV-1RNA或重组MDV-1RNA的两条链作为模板,只要酶过量,产物的合成就呈指数级。在等温条件下,可以在短时间内实现重组序列的大扩增。Invitro,Q-BetaReplicasecanutilizeotherRNAmoleculesbesidestheQ-BetaphageRNAastemplates.TheseincludevarioussubgenomicvariantRNAmoleculesthatwerefoundinQ-BetaReplicasereacti***,suchasmidivariant(MDV)RNAs,andother***allervariantRNAs.Inaddition,itcanalsouseother"non-natural"templatessuchaspoly(rC),RNAprimedwithanoligoribonucleotide,orRNAtailedwithseveralCresidues.RecombinantRNAmoleculesc***istingofRNAsequencesembeddedwithinmidivariantMDV-1RNAcanalsobereplicatedbyQ-BetaReplicase.2TheenzymeusesbothstrandsofMDV-1RNAorrecombinantMDV-1RNAsastemplates,andsynthesisofproductisexponentialsolongastheenzymeisinexcess.Largeamplificationofrecombinantsequencescanbeachievedinashorttimeunderisothermalconditi***.参数说明产品名称:Q-BetaReplicase货号:Q***1250规格:250U@1U/μl存储温度:-20℃品牌:lucigen/epicentre</p>供应商:中北林格</p>产地:us</p>发货地:北京</p>单位定义:一个Q-Beta***酶单位在30°C下使用20ng/µl的poly(rC)作为模板,在包含33mM的反应混合物中,在30°C的10分钟内催化将1nmolerGTP掺入poly(rG)中。三***酯(pH7.5),66mM***钾,10mM***镁,0.5mMDTT和1mMrGTP。UnitDefinition:OneunitofQ-BetaReplicasecatalyzestheincorporationof1nmoleofrGTPintopoly(rG)in10minutesat30°Cusing20ng/µlofpoly(rC)asatemplateinareactionmixturecontaining33mMTris-acetate(pH7.5),66mMpotassiumacetate,10mMmagnesiumacetate,0.5mMDTT,and1mMrGTP.储存缓冲液和条件:含有50mMTris-HCl(pH7.5),100mMN***,1mMDTT,0.1mMEDTA和0.1%TritonX-100的50%甘油。储存在-20°C的冰箱中,无霜循环。StorageBuffer&Conditi***:50%glycerolcontaining50mMTris-HCl(pH7.5),100mMN***,1mMDTT,0.1mMEDTA,and0.1%TritonX-100.Storeat-20°Cinafreezerwithoutadefrostcycle.10XTA反应缓冲液(另售):330mM三***酯(pH7.5),660mM***钾,100mM***镁和5mMDTT。10XTAReactionBuffer(***ailableseparately):330mMTris-acetate(pH7.5),660mMpotassiumacetate,100mMmagnesiumacetate,and5mMDTT.质量控制:通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,Q-Beta***酶的物理纯度大于95%。所有四个亚基均以相等的量存在。为了***小化Q-Beta模板污染Q-Beta***酶的可能性,EPICENTER仅使用poly(rC)作为确定活性的模板。不添加模板的Q-Beta***酶活性的酶促测定无法通过凝胶分析产生可检测到的RNA,因此排除了被酶指数扩增的RNA污染。凝胶分析还表明没有被大肠***DNA依赖性RNA聚合酶污染。该酶不含可检测的污染性核酸外切酶和核酸内切酶以及RNase活性。QualityControl:ThephysicalpurityofQ-BetaReplicaseisgreaterthan95%,asdeterminedbySDSpolyacrylamidegelelectrophoresis.Allfoursubunitsarepresentinequalamounts.InordertominimizethepossibilityofcontaminationoftheQ-BetaReplicasebyQ-Betatemplates,EPICENTREusesonlypoly(rC)asatemplatefordeterminingactivity.EnzymaticassaysofQ-BetaReplicaseactivitywithoutaddedtemplateproducenodetectableRNAbygelanalysis,thusrulingoutcontaminationwithRNAthatisexponentiallyamplifiablebytheenzyme.GelanalysisalsoindicatestheabsenceofcontaminationbyE.coliDNA-dependentRNApolymerase.Theenzymeisfreeofdetectablecontaminatingexo-andendonucleaseandRNaseactivities.图1.Qβ***酶的SDS-PAGE(泳道3)以及大肠***RNA聚合酶(泳道1)和分子量标记(泳道2)。标出了大肠***RNA聚合酶(β',β,σ和α)和Qβ***酶(S1,II,Tu和Ts)的亚基名称。Figure1.SDS-PAGEofQβReplicase(lane3)alongwithE.coliRNApolymerase(lane1)andmolecularweightmarkers(lane2).ThesubunitnamesofE.coliRNApolymerase(β´,β,σandα)andQβReplicase(S1,II,Tu,andTs)areindicated.ReferencesBlumenthal,TandCarmichael,GG.(1979)Ann.Rev.Biochem.48,525.Lizardi,PMetal.(1988)Biotechnology6,1197.T的Blumenthal和GG的Carmichael。(1979)安。生***学牧师。48,525。Lizardi,PM等。(1988)生物技术6,1197。epicentre***Q***1250Q-BetaReplicase供应商说明北京中北林格科技发展有限责任公司是一家专注于生命科学和生物技/术领域高新技/术企业。其前身是成立于1990年的专/业从事动物***生产及销售的生物技/术公司。是Lucigen总/代理,Biosearchtechnologies总/代理,epicentre总/代理,illumina总/代理,ICLLAB总/代理,ImmunoReagents总/代理,可提供优/质的常规生/化***以及分子***、蛋白研究、细/胞凋亡、信号转导、细/胞骨架蛋白、细/胞因/子、***、生物芯片等方面的相关产品。在与欧美合作中,中北林格已形成了独/特的市场优/势:产品齐/全、价格合理、经营稳健、信息反馈及时,并能随/时随地享/受国外供应商直接、周到的***服务。对此产品有兴趣,可联系中北林格获取更多详细信息。</p>)