1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗1体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚本乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，大鼠elisa***盒生产，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。3.加酶标抗1体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗1体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。4.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。5.终止反应：于各反应孔中加入2M***0.05ml。6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。保温在ELISA中一般有两次抗原抗1体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗1体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育(incubation)，有人称之为孵育。ELISA属固相***测定，抗原、抗1体的结合只在固相表面上发生。以抗1体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有***贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗1体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗1体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗1体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到***酶技术的成功与否，因此被称为关键的***。酶标记物中***1常用的是酶标记抗1体，它是将酶与特异性抗1体经适当方法连接而成。酶标记抗1体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗1体，其次要有良好的制备方法。目前，高质量的酶(如辣根过氧化物酶，简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗1体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上，宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。武汉默沙克-大鼠elisa***盒生产由武汉默沙克生物科技有限公司提供。武汉默沙克生物科技有限公司（）实力雄厚，信誉可靠，在湖北武汉的生***工等行业积累了大批忠诚的客户。公司精益求精的工作态度和不断的完善创新理念将***默沙克和您携手步入辉煌，共创美好未来！)