***的准备按***盒说明书的要求准备实验中需用的***。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液、洗涤液应用pH计测量。从冰箱中取出的试验用***应待温度与室温平衡后使用，一般室温平衡不低于30min。***盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。加样在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样（一般不建议使用）。有些指标检测（如间接法ELISA）需用稀释的血1清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血1清标本，然后在微型震荡器上震荡1min。加酶结合物工作液和底物工作液时可用多道移液器，使加液过程在***1短时间内完成。血浆用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，标本采集后30min内4℃1000×g离心15min，取上清即血浆。将上清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。避免使用溶血或高血1脂的标本。常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等，检测时还应仔细阅读***盒说明书，检查***盒是否对抗凝剂有特殊要求。细胞培养上清取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。(1)称取5mgHRP溶解于1ml蒸馏水中。1U0|)iL/Y/?.](2)于上液中加入0.2ml新配的0.1MNaIO4溶液，室温下避光搅拌20分钟。:|}%LN7?4e2g(3)将上述溶液装入透析袋中，对1mMPH4.4的醋1酸钠缓冲液透析，4℃过夜。(4)加20μl0.2MPH9.5碳酸盐缓冲液，牛elisa***盒，使以上醛化桯RP的PH升高到9.0~9.5，然后立即加入10mgIgG(抗1体，或SPA5mg)在1ml0.01M碳酸盐缓冲液中，室温避光轻轻搅拌2小时。9U#^amp;~.[7@(5)加0.1ml新配的4mg／mlNaBH4液，混匀，再置4℃2小时。#BTn;v7CF*H5}(6)将上述液装入透析袋中，对0.15MPH7.4PBS透析，4℃过夜。0m#a#G5V#x，S7p，B其余步骤(纯化)同戊二1醛标记步骤的(6)、(7)、(8)。3）结果判定：除标记物IgG量的计算，略有不同以外，其余均同戊二1醛法。5{%^%U/TX-Z0U-aIgG量(mg／ml)＝(OD280nm-OD403nm×0.3)×0.62(Q:p$fX，F0};s4）***及器材:1x-RT/e$iQ(1)0.1MNaIO4：称取241mg高碘1酸钠(广州化学***厂，批号830602)溶于蒸馏水10ml中。(2)1mMPH4.4醋1酸钠缓冲液:?.p﹨5N)?(K0.2MNaAc(1.361克／50ml)3.7mlr%g;oamp;m2r7t4O0.2MHAc(0.601ml／50ml)6.3ml加蒸馏水至2，000ml。(3)0.2MPH9.5碳酸盐缓冲液:3?!﹨$z*p7]gamp;X.E)z(fNa２CO３0.32克;s3C.i!A5q1G/w4{NaHCO３0.586克:H%EM!Ow-M加蒸馏水至50ml再用蒸馏水作20倍稀释，即成0.01MPH9.5的碳酸盐缓冲液。(4)NaBH４溶液(4mg／ml):临用时称取NaBH４4mg溶于1ml蒸馏水中。h(i*[6J，H%T(5)其它的***及器材可参见戊二1醛标记法。牛elisa***盒-默沙克(推荐商家)由武汉默沙克生物科技有限公司提供。武汉默沙克生物科技有限公司（）为客户提供“ELISA***盒,生化***等”等业务，公司拥有“默沙克”等品牌。专注于生***工等行业，在湖北武汉有较高知名度。欢迎来电垂询，联系人：莫经理。)