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辣根过氧化物酶是一种含亚铁血红素的蛋白质,HRP广泛分布于植物界,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同功酶组成,Mr在40000左右,等电点7.2。溶于水,溶解度为5%(W/V),溶液呈棕红色,透明。酶催化的***适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下的***铵溶液。HRP可溶于0.58饱和度以下的***铵溶液,而0.62饱和度以上则不溶。该酶***适pH7.0(对愈创木酚为氢给体而言)。在室温下,HRP几周内稳定,加热到63℃,在15min内稳定。氧化还原电势很低,pH6.08时,E0=-0.2070V,pH为7.71时,E′0=-0.2787V。HRP的辅基和酶蛋白***1大吸收光谱分别为403nm和275nm,一般以OD403nm/OD275nm的比值RZ(德文ReinheitZahl)表示酶的纯度。定性测定定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗1体作出有或无的简单回答,分别用阳性、阴性表示。阳性表示该标本在该测定系统中有反应。阴性则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。在间接法和夹心法ELSIA中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反,阴性孔呈色深于阳性孔。两类反应的结果判断方法不同,分述于下。保温在ELISA中一般有两次抗原抗1体反应,鱼ELISA***盒,即加标本和加酶结合物后。抗原抗1体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育。ELISA属固相***测定,抗原、抗1体的结合只在固相表面上发生。以抗1体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有***贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗1体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗1体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。鱼ELISA***盒-默沙克(推荐商家)由武汉默沙克生物科技有限公司提供。“ELISA***盒,生化***等”就选武汉默沙克生物科技有限公司(),公司位于:武汉市东湖新技术开发区南湖南路8号,多年来,默沙克坚持为客户提供好的服务,联系人:莫经理。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。默沙克期待成为您的长期合作伙伴!)
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