3).丙1酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至－15℃的丙1酮，放置片刻，在冰冻离心机中以4000r/min离心15min，弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙1酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中，透析除去丙1酮。可得RZ值近于1的酶溶液。4).精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L***锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10-3mol/L，5000r/min离心10min，得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米***纤维状松软物，HRP产品的?RZ?值可达3.0左右，豚鼠elisa***盒，置真空干燥器中低温保存。?3y;~/O3zBamp;A1d（4）酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致***作用，应注意防护。有条件者应使用不致***、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。进口分装：检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。***盒的标准曲线***1高点OD值均在2.0±0.2，零孔的OD值都控制在0.10以下。***盒的标准曲线相关系数R≥0.98。***盒重复性好，板内、板间变异系数均lt;9%。***的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成***量不足的情况。检测抗1体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30)，方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。(5)加0.2M赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。﹨0Y(I*K3j#M](6)在搅拌下逐滴加入等体积饱和***铵，置4℃1小时。(7)3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和***铵洗二次，***后沉淀物溶于少量0.15MPH7.4的PBS中。6s*w9jFv4N9R-A~(8)将上述溶液装入透析袋中，对0.15MPH7.4的PB缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏***检测)，10，000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。3）结果判定：5l5y#N%b0A*VT2w5b.﹨)B(1)定性及效价滴定：用特异性抗原(或抗1体)同酶标记抗1体(或抗***球蛋白抗1体)作双向琼脂扩散试验或***电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色，可初步鉴定其活性。***后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定(见本节(三)工作浓度的选择)。豚鼠elisa***盒-默沙克生物科技(在线咨询)由武汉默沙克生物科技有限公司提供。“ELISA***盒,生化***等”就选武汉默沙克生物科技有限公司（），公司位于：武汉市东湖新技术开发区南湖南路8号，多年来，默沙克坚持为客户提供好的服务，联系人：莫经理。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。默沙克期待成为您的长期合作伙伴！)