(5)加0.2M赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。﹨0Y(I*K3j#M](6)在搅拌下逐滴加入等体积饱和***铵，置4℃1小时。(7)3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和***铵洗二次，***后沉淀物溶于少量0.15MPH7.4的PBS中。6s*w9jFv4N9R-A~(8)将上述溶液装入透析袋中，对0.15MPH7.4的PB缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏***检测)，10，000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。3）结果判定：5l5y#N%b0A*VT2w5b.﹨)B(1)定性及效价滴定：用特异性抗原(或抗1体)同酶标记抗1体(或抗***球蛋白抗1体)作双向琼脂扩散试验或***电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色，可初步鉴定其活性。***后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定(见本节(三)工作浓度的选择)。（1）戊二1醛二步法)M~0Ll#k!D1）原理：戊二1醛为一种双功能***，通过其醛基分别与酶和***球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二1醛-***球蛋白结合物。6C，Q8jamp;rm2）标记步骤：(1)称取HRP25mg溶于1.25％戊二1醛溶液中，于室温静置过夜。5k*k)F9F5V%﹨(2)反应后的酶溶液经SephadexG-25层析柱，用生理盐水洗脱。流速控制在1ml／1分钟，收集棕色流出液。如体积大于5ml，则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中，缓慢搅拌。:e6V.j!|，b8_(3)将待标记的抗1体12.5mg用生理盐水稀释至5ml，搅拌下逐滴加入酶溶液中。(4)用1MPH9.5碳酸缓冲液0.25ml，继续搅拌3?小时。做好对照正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，猪elisa***盒，可采用羊血1清、兔血1清或BSA等封闭。实验条件的选择在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:（1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯1乙烯、聚本乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚本乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。猪elisa***盒-武汉默沙克由武汉默沙克生物科技有限公司提供。武汉默沙克生物科技有限公司（）位于武汉市东湖新技术开发区南湖南路8号。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前默沙克在生***工中拥有较高的知名度，享有良好的声誉。默沙克取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。默沙克全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)