表没食子***素没食子酸酯标本的采集及保存1.***：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000xg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000xg离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000xg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响***后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则：首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。***后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300pg/ml，150pg/ml，75pg/ml，37.5pg/ml，18.5pg/ml，9pg/ml，4.5pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制150pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。生物素标记***的稀释原则：临用前以生物素标记***稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记***加990μl生物素标记***稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。表没食子***素没食子酸酯样品测定1．移取xx微升去干扰液（ReagentC）到上述待测样品或标准样品管里，混匀2．加入xx微升反应液（ReagentD）3．加入xx微升显色液（ReagentE），混匀4．室温下孵育20分钟5．放进微型台式离心机离心3分钟，速度为5000g6．移取1毫升上清液到比色皿7．即刻放进分光光度仪检测，获得待测样品和标准样品读数表没食子***素没食子酸酯常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目标蛋白；其纯化条件是非变性的，因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。His标签是由6个组氨酸（His-His-His-His-His-His）组成的短肽，专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小，且较容易分离和纯化，是目前使用***广泛的一种。GST标签体系具有蛋白表达率高，表达产物纯化方便，利于GST***制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可从***裂解液中提取，在不变性的条件下通过亲和层析得到。GFP或其突变体EGFP等广泛用于***表达效率的检测，以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP***不经可以检测GFP或其适当的突变体，也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞内***，以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。Myc标签（序列为：EQKLISEEDL）已成功应用于WB杂交技术、***沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在***、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签***到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。HA标签系统利用一个HA（influenzahemagglutintinepitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签***也被广泛运用。MBP标签蛋白大小为40kDa，由大肠***K12的malE***编码。MBP可增加在***中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在***中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP***或表达的目的蛋白特异性***检测MBP标签标记的重组蛋白。其余标签***还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、***i、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HP***、HSV、KT3、KLH、MAT、ProteinA、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等，但应用相对较少。)