鸡绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒酶联免疫试验步骤将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。加样反应：加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。洗涤：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次，每次间隔30秒，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。显色：每孔加入底物液A50μl，再加底物液B50μl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。终止：每孔加入终止液50μl，轻轻振荡混匀，终止反应。测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。鸡绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒样品准备1．手术取出动物组织，并秤重以确定200毫克组织重量2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（ReagentA）清洗1次4．即刻用刀片切碎组织5．放进一个预冷的15毫升锥形离心管6．加入预冷的xx毫升清理液（ReagentA）7．涡旋震荡5秒，充分混匀8．即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约40至80下）9．将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管10．放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为10000g11．移取500微升到新的1.5毫升离心管12．加入xx微升稳定液（ReagentB），混匀13．放在冰槽里待测（注意：须1周内使用）鸡绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。500ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液250ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液125ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液62.5ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液31.25ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍（48T的20倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。)