冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色***盒实验开始前，制备好新鲜的线粒体置于冰槽里备用；同时将－20℃冰箱里的***融化，并预热氧电极仪到25℃。然后进行下列操作。加入2.5毫升介质液（ReagentA）到反应玻璃槽使用微型磁力子搅拌，充分混匀冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色***盒密封反应槽开始记录氧浓度：起始饱和氧浓度值为0.240微摩尔分子氧/毫升（25℃）持续记录1分钟后，***加入20微升待测的线粒体（总量2毫克）（注意：氧浓度可能瞬时变化）冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色***盒持续记录1分钟后，***加入20微升IV态底物液（ReagentB）――开始IV态呼吸（注意：参见注意事项9）冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色***盒持续记录2分钟：出现氧浓度缓慢下降继续***加入20微升III态底物液（ReagentC）（注意：氧浓度在10秒钟内开始下滑）――开始III态呼吸（注意：参见注意事项9）冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色***盒持续记录直至出现线性下行斜线出现拐点分别测算III态呼吸速率和IV态呼吸速率：氧浓度降低值÷实际时间（分钟）计算呼吸控制率：III态呼吸速率÷IV态呼吸速率冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色***盒http:///Products-ml冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色***盒http:///st335611/product_ml)