绵羊白介素23(IL-23)ELISA***盒操作步骤1.标准品的稀释：本***盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。500ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液250ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液125ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液62.5ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液31.25ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标***，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品***终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍（48T的20倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂***μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。绵羊白介素23(IL-23)ELISA***盒样品测定1．移取xx微升去干扰液（ReagentC）到上述待测样品或标准样品管里，混匀2．加入xx微升反应液（ReagentD）3．加入xx微升显色液（ReagentE），混匀4．室温下孵育20分钟5．放进微型台式离心机离心3分钟，速度为5000g6．移取1毫升上清液到比色皿7．即刻放进分光光度仪检测，获得待测样品和标准样品读数绵羊白介素23(IL-23)ELISA***盒操作注意事项1.***盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，***终结果乘以5才是样本实际浓度。4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5.所有液体组分使用前充分摇匀。)