细胞凋亡荧光检测***盒(Apoptosis Fluorometric Assay Kit)
细胞凋亡荧光检测***盒(ApoptosisFluorometricAssayKit)细胞凋亡是细胞的基本特征之一,在机体的胚胎发育、***修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。AnnexinV是一种分子量为35.8KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异结合。标记荧光物质的AnnexinV结合到凋亡细胞后,通过荧光颜色可以区分出凋亡细胞与正常细胞。Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,与DNA断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-3在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;但在细胞发生凋亡阶段,它被***,活化的Caspase-3由两个大亚基和两个小亚基组成,裂解相应的胞浆胞核底物,***终导致细胞凋亡。Caspase-3荧光光度法检测***盒就是根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽(Ac-DEVD)2-R110,其中DEVD是一个四肽化合物,在共价偶联时,R110不能被激发荧光,在连续两个反应步骤后,短肽被完全水解后释放出R110。水解的***步产生一个单肽中间体Ac-DEVD-R110,此物与吸收和发射波长与R110(ex\em=496/520nm)相似,但是只有R110激发荧光的10%。水解的第二步释放的自由的R110才能被激发发射荧光。根据释放的R110荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。***盒中的Ac-DEVD-CHO,是caspase-3的***剂,作为整个反应的负调控物。***盒中的R110用来做标准曲线,用来定量caspase-3的活力。CD95/Fas和TNF引发细胞凋亡过程中,一系列caspase级联式地活化,其中caspase-8的活化是其***步反应。快速检测哺乳动物细胞或者***裂解液中caspase-8活性,常用的办法将caspase-8序列特异性的多肽偶联至发色基团(Ac-IETD)2-R110,当该底物被caspase-8剪切后,R110即游离出来。可以测定荧光的发射强度,也可通过***或分光光度计(λ=405nm或400nm)测定其吸光值,来考察caspase-8的活化程度。***盒中也有Ac-IETD-CHO,R110,Celllysisbuffer,Assaybuffer。货号30008-2***盒内容物:100ml,CellLysisBuffer4*1.25mlAssayBuffer500ul酶底物(Ac-DEVD)2-R110(1mM)20ul酶***剂Ac-DEVD-CHO(5mM)1mlR110(80uM)订购信息:货号产品名称规格30008-2Caspase-3DEVD-R110Fluorometric&ColorimetricAssayKit100次30008-1Caspase-3DEVD-R110Fluorometric&ColorimetricAssayKit25次30009-1Caspase-3DEVD-R110FluorometricHTSAssayKit1mL30009-2Caspase-3DEVD-R110FluorometricHTSAssayKit10mL30009-3Caspase-3DEVD-R110FluorometricHTSAssayKit100mL30011-2Caspase-8IETD-R110FluorometricandColorimetricAssayKit100次30011-2Caspase-8IETD-R110FluorometricandColorimetricAssayKit100次30011-1Caspase-8IETD-R110FluorometricandColorimetricAssayKit25次30012-2Caspase-8IETD-R110FluorometricHTSAssayKit10mL30012-3Caspase-8IETD-R110FluorometricHTSAssayKit100mL30014-1Caspase-9LEHD-R110FluorometricandColorimetricAssayKit25次30014-2Caspase-9LEHD-R110FluorometricandColorimetricAssayKit100次30015-1Caspase-9LEHD-R110FluorometricHTSAssayKit1mL30015-2Caspase-9LEHD-R110FluorometricHTSAssayKit10mL30015-3Caspase-9LEHD-R110FluorometricHTSAssayKit100mL)
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