200×RiboGreen荧光染料RiboGreenRNA定量***是一种超灵敏的核酸荧光染料，使用这种染料可以对溶液中的RNA进行简单快速的定量。常规定量RNA的方法是在260nm处检测溶液的光吸收度，但是这种定量方法灵敏度差（4μg/mlRNA），且易受溶液中寡核苷酸、蛋白、盐离子等的影响。使用RiboGreen荧光染料可以避免上述这些问题。当RiboGreen荧光染料处于溶液状态时，其几乎没有荧光活性；当RiboGreen与RNA结合，其荧光活性将增加1000倍。RiboGreen-RNA复合物的荧光激发波长约500nm，发射波长约525nm。使用RiboGreen荧光染料可以检测到2.5ng/ml的RNA，这比260nm吸收法要高***倍。编号规格售价￥说明书***RF023100ul600.00RiboGreen荧光染料相关产品：20ⅹSybrGreenI荧光染料120.00/100ul20ⅹEvaGreen荧光染料200.00/100ul50ⅹROX荧光染料200.00/100ul10000×Goldview核酸染料150.00/ml10000×SYBRGreenIIRNA核酸染料800.00/100ul检测原理:检测方法:l***的准备：1.用超纯水将适量的20倍TE缓冲液稀释成1倍的，够当日实验用量即可。2.实验时需制备Quant-iTRNA工作液，可用1倍的TE（大范围25-1000ng/mlRNA）按1:200的比例；（小范围1-50ng/mlRNA）按1:2000的比例稀释浓缩染料液。3.溶液制备需用塑料器皿不能用玻璃器皿，因为***中某些成分会吸附到玻璃器皿表面。4.用箔金纸包裹或放置黑暗处避光保存。5.注意：溶液在制备后3小时内使用检测结果会比较好。l仪器准备：1.关掉Modulus单管型多功能检测仪电源开关，根据操作手册插入Blue荧光模块和微量适配器。2.打开电源开关，校准前先预热1min。3.仪器校准3.1：用1倍TE缓冲液稀释100μg/ml的标准样至符合大小范围检测的需要。制备实验所需2倍浓度的标准样。例如，制备2000ng/ml标准样，加RiboGreen工作液进一步将标准液稀释到1000ng/ml。3.2：加50μl标准样至含相同体积RiboGreen工作液（步骤3.1中制备）的小离心管中，充分混合，将100μl混合液转到微量比色杯中，***小检测体积75μl。3.3：用5个标准样来校准多功能机。选择“ng/µl”为测量单位，用浓度为0ng/µl的标准样为空白对照。选择与典型样品***接近的5个标准样，可获得更佳性能和更高***度。3.4保存这次校准数据以供将来使用（可选）l样品分析：1.加50μl待检样品至含相同体积RiboGreen工作液的小离心管中，颠倒混匀。2.将100μl的检测样转到微量比色杯中。3.读取每一样品，样品浓度会在多功能机显示屏上以ng/ml显示结果。注：不必在校准后再次运行标准曲线；检测校准的线性，再次读取标准样。参考文献:1.AnalBiochem17,100(1966)2.MolecularCloning:ALaboratoryManual,SecondEdition,J.Sambrook,E.F.FritschandT.Maniatis,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NewYork(1989).)