20×EvaGreen荧光染料
20×EvaGreen荧光染料EvaGreen是一种用于实时定量PCR(qPCR)的DNA结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于SYBRGreenI。除了有相似的光谱特性,EvaGreen有三个主要特点使它区别于SYBRGreenI。1.EvaGreen对PCR的***性远小于SYBRGreenI,因此,使用EvaGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。2.EvaGreen在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于SYBRGreenI扩增信号;较高浓度的EvaGreen也消除了“染料重分布”的缺陷,使EvaGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲线分析(HRM);该分析正被越来越多的用于PCR后的***分型和异源双链分析。由于SYBRGreenI对PCR的***性,从而要求其使用浓度必须很低,因此SYBRGreenI无法解决由低浓度造成的染料重分布问题,既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同时,染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性,因为低熔点的DNA链可能由于这种原因而无法检测到。3.EvaGreen的稳定性***。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被***。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。与之相反,SYBRGreenI不稳定而且降解后对PCR***性更强。编号规格售价¥说明书***RF024100ul200.00EvaGreen荧光染料相关产品:20ⅹSybrGreenI荧光染料120.00/100ul20ⅹRiboGreen荧光染料600.00/100ul50ⅹROX荧光染料200.00/100ul10000×EvaGreen核酸染料150.00/ml10000×SYBRGreenIIRNA核酸染料800.00/100ul产品特性:l极高的灵敏度在推荐浓度下使用时可以获得***强的PCR扩增信号。lPCR***性***智能化的“按要求释放”DNA结合技术使得EvaGreen对PCR的***远小于SYBRGreenI。l和快速PCR兼容对PCR干扰***,从而极大的缩短了PCR延伸时间。l非常适合HRM分析无“染料重分布”缺陷,兼容PCR后的高分辨率熔解曲线(HRM)分析。l兼容多重PCR在推荐浓度下使用时,无扩增子之间的染料迁移现象。l***稳定性在大部分生化条件下非常稳定,可在室温下储存并可反复冻融。l安全性好细胞膜穿透性测试表明,EvaGreen几乎不能穿透细胞膜,安全性高l优越的兼容性和SYBRGREENI光谱相似,和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用EvaGreen替代SYBRGreen1,毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备。使用方法:ReagentQuantity,for50μlofreactionmixtureFinalconcentration10XTa***ffer(withoutMgCl2)10ul1X25mMMgCl24-5ul2.0-2.5mM10mMdNTP1ul0.2mM20ⅹEvaGreen1.25-2.5ul0.5X-1XPrimerI(25pmol/ul)1ul0.5pmol/ulPrimerI(25pmol/ul)1ul0.5pmol/ulTaq(5U/ul)0.4ul2U/50ulTemplateDNAvariable50pg-1μgddH2OUpto50ul参考文献:1.Mao,etal.CharacterizationofEvaGreenDyeandtheimplicationofitsphysicochemicalpropertiesforqPCRapplicati***.BMCBiotechnology7,76(2007).2.TheRoyalSocietyofChemistry(2014),doi:10.1039/c3an02334f)