ELISA检测***盒实验原理
ELISA实验原理用于***酶技术的酶有很多,如过氧化物酶,碱性***酶,β-D-半乳糖苷酶,葡萄糖氧化酶,乙酰***酯酶,6-磷酸葡萄糖脱氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根过氧化物酶,碱性***酶等,其中尤以辣根过氧化物酶为多。由于酶摧化的是氧化还原反应,在呈色后须立刻测定,否则空气中的氧化作用使颜色加深,无法准确地定量。ELISA***盒批发辣根过氧化物酶(HRP)是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。氯化血红素辅基的***大吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的***大吸收峰是275nm,所以酶的浓度和纯度计算式是(已知HRP的A(1cm403nm1%)=25,式中1%指HRP百分浓度为100ml含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶浓度以mg/ml计算是HRP的A(1cm403nmmg/ml=2.5)HRP纯度(RZ)=A403nm/A275nm纯度RZ(ReinheitZahl)值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度HRP的RZ值在3.0左右,***高可达3.4。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。ELISA***盒批发ELISA的基本原理有三条:(1)抗原或***能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚***表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其***学活性;(2)抗原或***可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其***学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或***结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有***反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或***的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。ELISA法是***诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的***病、***病及非***病等方面的***诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于***流行病学调查。ELISA***盒批发本法不仅可以用来测定***,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物***各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:1、***酶染色各种细胞内成份的***。2、研究抗酶***的合成。3、显现微量的***沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或***成份。了解更多内容,请前往:/商铺网址:/st29928)
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