犬***球蛋白E(IgE)ELISA***盒***盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。2.灵敏度：***低检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6个月犬***球蛋白E(IgE)ELISA***盒***盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测***-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120pg/mL犬***球蛋白E(IgE)ELISA***盒操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测***100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用***洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。犬***球蛋白E(IgE)ELISA***盒酶联***试验步骤将所需***从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需***到室温以充分溶解，每种液体***使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。加样反应：加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50μl/孔，再加入50μl/孔的***工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。洗涤：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次，每次间隔30秒，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。显色：每孔加入底物液A50μl，再加底物液B50μl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。终止：每孔加入终止液50μl，轻轻振荡混匀，终止反应。测吸光值：用***于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。)