***组化原理
***组化原理******化学利用了***和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将***或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过***动物后获得特异性的***,再以此***去探测***或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与***的复合物是无色的,因此还必须借助于***化学的方法将抗原***结合的部位显示出来,以其达到对***或细胞中的未知抗原进行定性,***或定量的研究。***组化操作步骤⑴、石蜡切片脱蜡至水。⑵、3%H2O2室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。⑶、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟x2(如需抗原修复,可在此步后进行)。⑷、5-10%正常山羊***(PBS稀释)封闭,室温孵育10分钟,倾去***,勿洗。滴加一抗工作液,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。⑸、PBS冲洗,5分钟x3次。⑹、滴加适量生物素标记二抗工作液,37℃孵育10-30分钟。⑺、PBS冲洗,5分钟x3次。⑻、滴加适量的辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素工作液,37℃孵育10-30分钟。⑼、PBS冲洗,5分钟x3次。⑽、显色剂显色3-15分钟(DAB或NBT/BCIP)⑾、自来水充分冲洗,***素复染,脱水,透明,封片。***组化结果判定:阳性***为棕色(DAB显色)或是紫红色(NBT/BCIP)着色***组化http:///Products-mlhttp:///st397283/ml)
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