笃玛 枸橼酸纳抗凝兔血 产品介绍
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枸橼酸纳抗凝兔血小牛***和胎牛***有何区别与注意事项?来源不同:胎牛***(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的***,新生牛(小牛)***(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。组份与比例不同:两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、***及其他活性物质等组份与比例不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛***才能生长,而有些细胞只需小牛***即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。***保存和使用须注意:***应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻***时,应先将***至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,***不可将冷冻的***直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,***在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。枸橼酸纳抗凝兔血***的保存注意事项(1)需要长期保存的***必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于***结冰时体积会增加约10%,因此,***在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的***.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使***中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成***沉淀物显著增多,而且还会影响***的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.(3)瓶装***解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的***放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将***从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.(4)一般厂商提供的***为无菌,无需再过滤***.如发现***有悬浮物,则可将***加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤***.(5)***中的沉淀物絮状物:主要是***中的脂蛋白变性及解冻后***中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响***本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下"小黑点":经过热处理过的***,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为***受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑***质量,则应立即停止使用,更换另一批号的***.(6)切勿将***在37℃放置太久,否则***会变得浑浊,同时***中的有效成分会破会而影响***质量.枸橼酸纳抗凝兔血操作步骤试管法(改良Mayer法)1、致敏羊红细胞:2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素(1:2000),混匀,置37℃水浴30min。2、稀释***:待测***0.2ml,加应用液3.8ml,稀释度为1:20。3、配制溶血标准管:全溶血管:2%绵羊红细胞2ml加8ml蒸馏水,混匀。50%溶血管:取全溶血管液2ml加缓冲液2ml。4、按表所示,依次加各成分于试管中,混匀,置37℃水浴30min,第10管为非溶血对照:补体CH50测定试管法5、结果测定:取出试管,2000r/min离心10min,对照管应不溶血。肉眼比色,选与50%溶血标准管相近二管,再用分光光度计测(波长542nm、0.5cm比色杯)OD值,确定与标准管***接近者为终点管,然后按下公式计算CH50值:***补体CH50(U/ml)=(1/***用量)×稀释度。如第5管为终点管,测待测***中CH50为66.7U/ml。***补体CH50正常值为50-100U/ml。)
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