EDTA抗凝牛血***及配制1、缓冲盐水：（1）贮存液：Na2HPO4.12H2O2.85gKH2PO40.27gN***17.00g蒸馏水定容至100ml4℃保存备用（2）应用液：5ml贮存液加95ml蒸馏水，再加10%***镁0.1ml，当日配制，12小时内使用。2、2%绵羊红细胞：无菌采取绵羊血液，于等量Alsever液中可保存3周。用前以缓冲液洗3次，并配成2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。3、溶血素：将绵羊红细胞溶血素（效价1:4000），用应用液做1:2000倍稀释（即1ml溶血素加1999ml应用液）。4、待测***：新鲜血液室温放置30min，再4℃放置60min，使血块收缩，4℃离心（3000r/min）10min，取上清，-20℃保存。EDTA抗凝牛血标本要求1.***：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸***、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入***蛋白萃取***，以使细胞***并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.***标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或***蛋白萃取***,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3的样品，因NaN3***辣根过氧化物酶的（HRP）活性。EDTA抗凝牛血人***说明：1、不含防腐剂；***病HIV，***TP、***HBV、丙肝HCV，四个标本检测均为阴性。未灭活，未***，不能用于临床2、为实验材料，以及作为动物***、病理组化封闭、***IGG制备、细胞培养、ELisa等***实验中的封闭及保护剂的使用。3、***解冻后有浊度或少量悬浮物，为蛋白聚合体，不会影响***的质量，如有必要用0.45um滤膜过滤。)