笃玛 羊抗人****** 说明书
价格:1.00
羊抗人******标本要求1.***:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。3.尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸***、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入***蛋白萃取***,以使细胞***并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.***标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或***蛋白萃取***,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3***辣根过氧化物酶的(HRP)活性。羊抗人******操作步骤试管法(改良Mayer法)1、致敏羊红细胞:2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素(1:2000),混匀,置37℃水浴30min。2、稀释***:待测***0.2ml,加应用液3.8ml,稀释度为1:20。3、配制溶血标准管:全溶血管:2%绵羊红细胞2ml加8ml蒸馏水,混匀。50%溶血管:取全溶血管液2ml加缓冲液2ml。4、按表所示,依次加各成分于试管中,混匀,置37℃水浴30min,第10管为非溶血对照:补体CH50测定试管法5、结果测定:取出试管,2000r/min离心10min,对照管应不溶血。肉眼比色,选与50%溶血标准管相近二管,再用分光光度计测(波长542nm、0.5cm比色杯)OD值,确定与标准管***接近者为终点管,然后按下公式计算CH50值:***补体CH50(U/ml)=(1/***用量)×稀释度。如第5管为终点管,测待测***中CH50为66.7U/ml。***补体CH50正常值为50-100U/ml。羊抗人*********及配制1、缓冲生理盐水:(1)贮存液:Na2HPO4.12H2O2.85gKH2PO40.27gN***17.00g蒸馏水定容至100ml4℃保存备用(2)应用液:5ml贮存液加95ml蒸馏水,再加10%***镁0.1ml,当日配制,12小时内使用。2、2%绵羊红细胞:无菌采取绵羊血液,于等量Alsever液中可保存3周。用前以缓冲液洗3次,并配成2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。3、溶血素:将绵羊红细胞溶血素(效价1:4000),用应用液做1:2000倍稀释(即1ml溶血素加1999ml应用液)。4、待测***:新鲜血液室温放置30min,再4℃放置60min,使血块收缩,4℃离心(3000r/min)10min,取上清,-20℃保存。)
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