蛋白表达与纯化技术服务--***低3000.00/蛋白，***！步骤1.目标***全***合成：从***库中搜索目标蛋白的cDNA序列。根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化，密码子优化。合成设计好的***序列。提供给客户：目标***（在T载体或常规穿梭载体上）及测序报告。价格：3.80元/碱基,如果客户直接提供构建好的质粒，则免去这部分费用．时间：2~3周，根据***的大小而定.详见全***合成服务步骤2.目标***亚***：扩增并抽提含有目标***的载体质粒。将目标***亚***到合适的表达质粒上。测序验证构建质粒的准确性。闪晶生物免费提供如下表达载体：ExpressionVectorPromoterTagpET3a,pET11a,pET24aT7/acNoneorT7TagpET32aT7/acTRX&HISpET41aT7/acGST&HISpET22b,pET25b,pET26bT7/acSecretpET28a,pET15b,pRSETbT7/acHISpET50b,pET43aT7/acNus,HISpPEPTIDET7/acHISpMAL-c2xT7/acMBPpGEX4T,pGEX5X,pGEX6PT7/acGSTpQE30T5HISpTrcHisBTrcT7,HISpTWINT7/acIntein,CBDpBV220PRPLNone提供给客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。价格：免费时间：1-2周步骤3.E.coli表达菌株转化及筛选：扩增并抽提构建好的表达质粒。将表达质粒转化到***的E.Coli表达菌株中。至少挑选5个阳性***于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单***菌株用于目标蛋白的表达。可提供表达菌株：DH5α,***0,JM115,BL21(DE3),BL21(DE3)pLys,XL1Blue,XL10Golden,Rosetta-gami。提供给客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。价格：免费时间：1周步骤4.目标蛋白表达及纯化：摇瓶培养1L重组***，诱导表达目标蛋白。通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。利用蛋白酶去除不需要的纯化标签，再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制***终产品质量。通过Western-blot验证目标蛋白正确性。提供给客户：纯化好的目标蛋白1~5mg及纯化报告。价格：1.如果目标蛋白含有亲和标签（His-tagorGST-tag）5,000元（目标蛋白纯度>80%，不切除标签）5,500元（目标蛋白纯度>90%，不切除标签）6,000元（目标蛋白纯度>80%，切除标签）6,500元（目标蛋白纯度>90%，切除标签）2.如果目标蛋白不含有亲和标签8,000元（目标蛋白纯度>80%）9,000元（目标蛋白纯度>90%）3.如果没有获得目标蛋白，则不收取任何费用(仅限客户直接提供构建好的质粒时)。时间：2~3周备注：1.因为每个重组蛋白的表达量及纯化得率都不相同，我们***终根据实际情况将给客户提供***少1mg，***多10mg的目标蛋白，所收取的费用是相同的。2.我们提供的***终产品一般为保存于常规的缓冲液（Tris-HCl，PBS或***-***钠缓冲液）中蛋白质溶液，并且其中不含有尿素或盐酸胍等变性剂。3.每次Westernblot检测***多7个样品，因为要加入阳性对照，阴性对照以及Marker。本步骤只包含一次免费检测，如果需要更多次检测则费用为1500元/次。我们可以免费为客户提供抗His-tag的一抗，如果客户需要使用其他一抗，则需要客户提供。详见WesternBlot检测服务.其它相关技术服务多******制备服务荧光定量PCR检测服务多肽合成服务ELISA检测服务详情请登入http://.cn或来电021-54460832E-mail:lou800624@Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4GensyntheseTaqDNAPolymeraseTaqPolymeraseGeneSynthesisDNASynthesePeptideSynthesis全***合成***合成密码子优化多肽合成细胞培养细胞转染细胞稳转细胞瞬转***印迹westernblot蛋白质印迹载体构建蛋白表达蛋白表达纯化)