siRNA质粒载体构建技术服务RNAi(RNAinterference,RNA干扰)技术，即将与内源mRNA编码区同源的小片段（19－23bp）外源双链RNA（doubles`trandedRNA）导入细胞中，通过一系列细胞内反应引发细胞中相应mRNA的降解，从而导致特定***表达沉默的一种技术。RNAi的作用提供了一种经济、快捷、***的***特异***表达的技术手段，有助于研究该***在生物模型系统中的作用，是研究***功能的重要工具，并且逐步成为病毒性***、遗传性***以及***等的******研究的一种手段。基本原理示意图siRNA构建技术服务本公司提供siRNA载体的构建服务，siRNA载体可以在细胞内直接转录出shRNA，其干扰效果等同于siRNA，而且能够解决siRNA干扰时间短的缺点。您只需提供需干扰***的详细信息，包括***的mRNA序列，GenbankAccessionNo.和所属物种，本公司负责设计3条针对目的mRNA的siRNA靶序列，在短时间内构建三个可用于目的mRNA干扰实验的siRNA载体。可以为您节省大量的时间与精力。此方法是多种siRNA制备方法中***可以进行长期***沉默研究的方法。闪晶生物siRNA载体构建服务程序：1.siRNA表达载体的选用：本公司选用的siRNA表达载体含新***抗性***和GFP绿色萤光标记，可以建立稳定表达系，同时可以实时监测载体在细胞中的转染效率。载体中还含有Amp抗性***，可以无限扩增。2.设计siRNA靶序列A、根据目的mRNA序列，设计3条RNA干扰靶序列，靶序列一般为19－21nt长。B、对于每条选定的siRNA靶序列，设计siRNA正义链和反义链，以loop(9nt)相连，称为shRNA（shorthairpinRNA）。C、阴性对照的设立.3.合成模板：合成每条编码shRNA的DNA模板的两条单链，退火DNA单链得到shRNA的DNA双链模板。模板链后面接有RNAPolyIII聚合酶转录中止位点，同时两端分别设计BamHI和HindIII酶切位点，可以***到siRNA载体多***位点的BamHI和HindIII酶切位点之间。4.siRNA空载体用BamHI和HindIII双酶切后，1％琼脂糖凝胶电泳，回收线性载体。5.连接与转化：把退火的DNA模板双链连接到线性载体中。采用T4连接酶，插入片断与载体的摩尔比约为3：1。连接产物转化DH5α大肠***，在LBAmp培养基上涂板，37℃培养过夜。6.PCR鉴定7.测序鉴定8.柱抽提阳性***载体并定量。收费标准个数价格(￥)时间1-3个siRNA表达载体构建1800.00/个14个工作日4－10个siRNA表达载体构建1500.00/个20个工作日10个以上协商协商闪晶生物同时提供腺病毒和慢病毒载体的构建服务,5000.00元/个.联系电话：021-54460831-11E-mail:master@.cn乘车路线：火车站坐1号地铁到终点,然后换乘5号线到北桥站即可。http://.cnGensyntheseTaqDNAPolymeraseTaqPolymeraseGeneSynthesisDNASynthesePeptideSynthesis全***合成***合成密码子优化细胞培养细胞转染细胞稳转细胞瞬转)