武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。而野1生型水稻在相同处理条件下出现明显枯萎，叶片中H2O2大量积累。目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞定位,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优劣。方法从白木香愈伤组织中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS基因,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP2种植物表达载体,分别利用根癌农侵染叶片、基因枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞定位。采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根癌农介导将PnCHI1转入中过量表达。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS基因与GFP的融合蛋白产物在叶片中定位于胞质,在洋葱表皮中定位于胞质和细胞核,白木香原生质体中定位于胞质和质体。结论ASS基因在白木香原生质体胞质及质体定位;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞定位可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,广泛存在于植物细胞中,是抗真菌防卫反应体系的重要组成部分。几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,广泛存在于植物细胞中,是抗真菌防卫反应体系的重要组成部分.该文深入分析了1种三七几丁质酶基因PnCHI1的功能.构建PnCHI1的亚细胞定位载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1定位于细胞壁中.构建PnCHI1的原核表达载体,诱导并纯化获得重组蛋白,体外平板抑菌实验结果显示PnCHI1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的抑制活性.采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根癌农介导将PnCHI1转入中过量表达.qRT-PCR分析结果表明PnCHI1在T2代转基因中大量表达,同时叶片接种实验显示PnCHI1转基因对茄腐镰刀菌的抗性增强明显.结论:PnCHI1是定位于细胞壁的几丁质酶,体外能抑制几种三七根腐病真菌,在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性,推测PnCHI1是三七中参与根腐病防卫反应的重要抗病基因.武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。植物油脂是人们膳食的主要成份,人类日常生活及饮食所需的油脂有71%来自植物油。是常见的、对人类健康危害比较严重的环境污染物之一,可通过皮肤、呼吸道和消化道等途径进入人体,导致身体组织发生病变,从而引起多种疾病和的发生。因此,毒性研究已经成为大家关注的焦点之一。能抑制细胞分裂,诱导微核形成,导致部分细胞,但的毒性作用机制不是很清楚。但是马铃薯是同源四倍体，遗传分离复杂，加之高淀粉、低还原糖和低温下不糖化的育种材料有限，故运用常规育种方法培育淀粉含量高、低还原糖和抗低温糖化的优良品种难度极大。酵母具有遗传背景简单,生长周期短等优点,是研究真核生物细胞学机制的模式生物。已有研究证明,可以诱导酵母细胞凋亡,并且伴随着胞内活性氧(ROS)水平的升高,但是关于诱导酵母细胞凋亡的调控机制研究尚处在起步阶段,尤其是动物体内相对保守的凋亡抑制基因BCL-2和CED-9在此过程中的作用尚未见报道。本文以酵母细胞为主要材料,研究了亚诱导细胞的作用机制。主要实验结果如下：浓度为1-7mmol/L的亚可抑制酵母细胞生长,并具有剂量依赖性,其中7mmol/L亚几乎完全抑制了细胞的生长和分裂。亚可诱导酵母细胞,细胞率随处理浓度的升高和作用时间的延长逐渐升高。利用ROS荧光指示剂DCFH-DA,Ca2荧光指示剂Fluo-3AM和NO荧光指示剂DAF-FMDA检测胞内ROS、Ca2和NO水平,发现亚可诱导酵母胞内ROS,Ca2和NO水平显著升高。)