亚细胞***-武汉思特进
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内***对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种GFP标签蛋白质表达载体,分别在GFP的N和C端预留位点,以目的***。利用该***载体,分别内切酶FokI的切割结构域与MS2噬菌体外壳蛋白MCP的串联蛋白(FokI:MCP:FokI,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF与GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端带有细胞核***信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察GFP荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的***和GFP的表达载体pER35GFP-FMF和pER35FMF-GFP。激光共聚焦结果显示侵染了只含GFP载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到GFP的绿色荧光,而侵染了含核***信号FMF:GFP和GFP:FMF2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞***,具有简单、和通用性的特点。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。洋葱(AlliumcepaL.)属百合科葱属,是世界主栽蔬菜之一,也是我国主要的出口蔬菜之一。FT(FLOWERINGLOCUST)***是开花植物光周期反应过程中调控植物成花的关键***,也是重要的开花整合因子。实验室在前期工作中已经成功了洋葱的开花素类似***AcFT1及AcLFT,为确定其功能,本试验分别构建了AcFT1及AcLFT的正义、反义和RNAi干扰的植物表达载体,通过冻融法导入到根***农EHA105中,进而通过花序侵染法转入模式植物拟南芥中。通过荧光定量PCR法测定AcFT1及AcLFT在拟南芥抽薹前叶片中的相对表达含量,观察转化植株的形态学指标,继而确定AcFT1及AcLFT在洋葱成花中的作用,为实现洋葱抽薹开花的***调控提供参考。试验结果归纳如下:⑴构建了AcFT1的正义植物表达载体pZ-AcFT1,亚细胞***,反义植物表达载体pR-AcFT1,RNAi植物表达载体pRNAi-AcFT1;构建了***FT的正义植物表达载体pZ-***FT,反义植物表达载体pR-AcLFT,RNAi植物表达载体pRNAi-AcLFT.;⑵利用冻融法将重组质粒pZ-AcFT1、pR-AcFT1、pRNAi-AcFT1、pZ-AcLFT、pR-AcLFT、pRNAi-AcLFT导入根***农EHA105中,利用花序侵染法对拟南芥进行转化。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞***及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE2000)为载体分别以Cθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激...亚细胞***-武汉思特进由武汉思特进科技发展有限公司提供。武汉思特进科技发展有限公司是湖北武汉,办公、文教项目合作的企业,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在思特进***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创思特进更加美好的未来。)
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