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4种肺动脉高压(PH)动物模型肺血管重构模式的差异方法:雄性SD大鼠(350-400g),分别通过腹主动脉-腔静脉分流(A-VF,n=10)、左肺切除(PE,n=10)、野百合碱***(MCT,n=10)、左肺切除MCT(PEMCT,n=12)4种方法建立PH模型.检测平均肺动脉压力(mPAP)、RV/(LVS)重量比值、肺小动脉中膜厚度百分比(WT%)、无肌性动脉肌化程度和新生内膜(neointima)形成、新生内膜增殖度和血管阻塞计分(VOS).结果:在PEMCT组(肺切除术后5周,MCT***后4周)右肺腺泡内血管出现了新生内膜病变,其它组均没有新生内膜病变形成.PEMCT组的动物出现了严重的右心室肥大,动脉中膜明显增厚,平均肺动脉压(mPAP)和无肌性血管肌化程度显著增加;A-VF、PE和MCT组仅形成轻-中度的右心室肥大、mPAP升高和小动脉肌化.结论:左肺切除联合应用MCT能成功诱导大鼠PH新生内膜模型,该模型能更好地模拟人类严重PH的病理改变,是研究梗阻性PH更为适用的动物模型.实验动物的给法(一)***给药法1.皮射***时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持将针头刺入,固定后即可进行***。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部***;蛙可在脊背部淋巴囊***;狗多在大腿外侧***,拔针时,轻按片刻,防药液逸出。2.皮内***此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内,观察其消失速度和局部血液循环变化,作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是:将动物***部位的毛剪去,消毒后,用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内,然后使针头向上挑起并再稍刺入,南京动物实验外包,即可***药液。***后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。3.肌肉***当给动物***不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉***。肌肉***一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位,多选臀部。***时针头要垂直快速刺入肌肉,如无回血现象即可***。给大、小鼠作肌肉***时,选大腿外侧肌肉进行***。4.腹腔***先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45度角方向穿过腹肌刺入腹腔,动物实验外包公司,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。5.静脉***是将药液直接***于静脉管内,使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快,作用时间较短。小鼠、大鼠的静脉***:常采用尾静脉***。鼠尾静脉共有3根,左右两侧和背侧各1根,两侧尾静脉比较容易固定,故常被采用。操作时,先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75%酒精棉球反复擦试使血管扩张,并可使表皮角质软化,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,***时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。实验动物的编号编号实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。(一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。(二)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵,用耳号钳刺上号码,然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。(三)法:用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下,也可用于兔、狗等动物。(四)化学***涂染动物被毛法:经常应用的涂染化学***有涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。涂染***:3-5%溶液。涂染黑色:煤焦油的酒精溶液。根据实验分组编号的需要,可用一种化学***涂染实验动物动物背部被毛就可以。如果实验动物数量较多,则可以选择两种染料。该方法对于实验周期短的实验动物较合适,时间长了染料易退掉;对于哺乳期的子畜也不适合,因母畜容易咬死子畜或把染料舔掉。(五)剪毛法:该法适用于大、中型动物,如狗、兔等。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码,此法编号清楚可靠,动物实验外包一般多久,但只适于短期观察。(六)打孔或剪缺口法:可用打孔机在兔耳一***置打一小孔来表示一定的号码。如用剪子剪缺口,动物实验外包推荐,应在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出来。该法可以编至1~9999号,此种方法常在饲养大量动物时作为终身号采用。南京动物实验外包-英瀚斯-动物实验外包公司由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司(www.enhancer-/)为客户提供“***病理,细胞生物,分子生物学平台,动物模型***科研外包服务”等业务,公司拥有“英瀚斯”等品牌,专注于技术合作等行业。欢迎来电垂询,联系人:戴经理。)