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CellCountingKit-8(简称CCK-8)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测***。WST-8【化学名:2-(2-甲氧ji-4-硝ji苯ji)-3-(4-硝ji苯ji)-5-(2,细胞实验外包平台,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,是一种类似于MTT的化合物,它在电子载体1-甲氧ji-5-甲ji吩嗪鎓***二jia酯(1-MethoxyPMS)存在的情况下,被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙***甲瓒产物(formazan)。细胞增殖越多越快,颜色越深;细胞毒性越大,南京细胞实验外包,则颜色越浅,对于同样的细胞,颜色的深浅与活xi胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。磁性细胞标记方式应用MACS技术进行磁性细胞分选重要的一点是高质量的标记。要尽可能地增强阳性细胞的标记,并减弱背景染色。有两种基本的磁性标记方式:直接标记和间接标记。1、直接磁性细胞标记(Directmagneticcelllabeling)(磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞)直接标记是快速、***特异的磁性标记方法。目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的MACS直标微珠可供选用。2、间接磁性细胞标记(Indirectmagneticcelllabeling)(磁珠结合不需要的细胞,游离于磁场的细胞为所需细胞)间接磁性细胞标记需要联合使用单ke隆或者多ke隆抗ti和MACS间标微珠。未结合抗ti、生物素化抗ti或者荧光素标记抗ti均可作为一抗标记细胞,再使用抗免yi球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗,均可用于间接标记。间接标记主要在如下情况时选用:当没有直标磁珠时;需要用几种抗ti的混合物同时分选或去除多种类型的细胞;间接标记有放大作用,细胞实验外包报价,因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用;使用自备或者配体的磁珠分选中。(-般而言,阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大,阳性分离法用行更多。)脂质体瞬时转染1、细胞H9C2(Hela)6孔板Hela1x10°/孔。2、转染前换上没有抗sheng素的DMEM胎清(10%)。3、将质粒DNA(约2-4ul)2ul加入dorf管中DMEM至50u1。4、脂质体5ul补培养基至50ul混匀静止5分钟(质粒与脂质体比例为1:2或1.5:2.5)。5、将含有脂质体的培养基与含质粒的混合总体积100ul室温放置30分钟。6、吸取混合物均匀加入每一个孔中。7、将6孔板放入培养箱中继续培养6小时后吸出培养基换上新配置的培养基DMEM6ml胎清600u1三抗300u1。8、培养24小时。南京细胞实验外包-英瀚斯-细胞实验外包报价由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司(www.enhancer-/)有实力,信誉好,在江苏南京的技术合作等行业积累了大批忠诚的客户。公司精益求精的工作态度和不断的完善创新理念将促进英瀚斯和您携手步入辉煌,共创美好未来!)