细胞老化的表现：细胞折光性变差，镜下可见细胞“变薄”，做转染实验时，细胞死率会较高。但培养液不会发生迅速变黄的现象，仍清亮。（但如果是***污染的话，一般会出现培养液的迅速变黄，混浊，镜下可见大量繁殖的***；若是支原体污染的话，细胞也会失去正常形态，会有细胞的死）。细胞的贴壁性减弱，开始有细胞漂浮于培养液中。支原体污染预防：1.水盘为维持培养箱湿度所必需，但也成为潜在的污染源，BI的Aquaguard-1(货号:01-867-1B100ml,稀释100倍使用)消毒水盘效果非常好，而且不会腐蚀不锈钢，***，不挥发。2.其他实验室的水浴环境也容易造成污染，BI的Aquaguard-2(货号:01-916-1E50ml,稀释500倍使用)，可以有效消毒任何形式的水浴环境。ATP发光法，ATP是细胞的能量直接来源，ATP发光法是藉由检测细胞内ATP含量来分析细胞增殖。市面上的原理是利用外源的萤火虫荧光素（Luciferin）与荧光素酶（Luciferase），以细胞内含的ATP为能量来源，发生氧化反应产生生物冷光，因此可通过监测冷光光度，来对应ATP含量并判断细胞增殖状况。EdU检测法，EdU原理跟BrdU检测法很像，并加入能与Edu反应的荧光染料，即可利用检测荧光值侦测应用于细胞增殖，或在细胞***级别作为标记跟踪等研究，实验过程不需要经过BrdU检测法的DNA变性处理。细胞***的检测：1.DNA损伤检测，在***细胞中会启动DNA损伤信号p53，细胞***通路p53是被细胞DNA损伤而受到DNA损伤回应通路的激。2.β-半乳糖苷酶(senescenceassociatedβ-galactosidase,SA-β-gal)活性染色，β-半乳糖苷酶主要位于溶酶体，当细胞***发生时，溶酶体膨胀并且增多，β-半乳糖苷酶明显积累在溶酶体中，因此SA-β-gal染色法为检测细胞***普遍常见的指标。不过在一些特殊情况下，例如，饥饿引发的细胞休眠(quiescence)也会出现SA-β-gal染色呈现阳性。)