武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉（直径为1μm），加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液，取100μL放在含有1。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,广泛存在于植物细胞中,是抗真菌防卫反应体系的重要组成部分.该文深入分析了1种三七几丁质酶基因PnCHI1的功能.构建PnCHI1的亚细胞定位载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1定位于细胞壁中.构建PnCHI1的原核表达载体,诱导并纯化获得重组蛋白,体外平板抑菌实验结果显示PnCHI1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的抑制活性.采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能,通过根癌农介导将PnCHI1转入中过量表达.qRT-PCR分析结果表明PnCHI1在T2代转基因中大量表达,同时叶片接种实验显示PnCHI1转基因对茄腐镰刀菌的抗性增强明显.结论:PnCHI1是定位于细胞壁的几丁质酶,体外能抑制几种三七根腐病真菌,在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性,推测PnCHI1是三七中参与根腐病防卫反应的重要抗病基因.武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；构建PnCHI1的亚细胞定位载体,转入洋葱表皮细胞中瞬时表达,在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1定位于细胞壁中。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。胞质Ca~(2)是重要的第二信使,通过Ca~(2)结合蛋白产生磷酸化信号级联,调控下游基因表达。钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentproteinkinases,CDPKs)是一类仅在植物和部分原生生物中存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在钙信号转导中具有重要功能。越来越多的证据表明,CDPKs广泛参与植物生长发育、病原防御、非生物环境胁迫等生理反应的信号传递过程。目前在水稻中已发现31个CDPKs基因,但功能明确的只有少数几个基因,本研究的目的就是利用超量表达和RNA干涉(RNAinterference,RNAi)技术分析水稻OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29的功能,为利用基因工程技术培育水稻新品种提供新的基因资源和理论指导。本研究的主要试验结果如下:1.通过RT-PCR方法检测了OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29三个基因在粳稻品种日本晴分蘖期的根、成熟叶片、穗尖至剑叶叶枕距离分别为0cm、0-1cm、1-3cm、3-5cm、5-8cm、8-12cm、12-16cm、16-20cm、20-25cm、25-30cm、灌浆期稻穗(命名为P1-P12)中的表达谱。1、2、3和Os02g47210)基因全长CDS,并对该基因编码的蛋白质进行有效的生物信息学分析,结果显示:Os03g37984有5种不同的剪切方式,编码5种OsPUT3蛋白。试验结果显示:OsCPK2和OsCPK29时期稻穗中表达量较高,在成熟叶片和P12时期稻穗中表达量很低,在分蘖期的根和幼穗中不表达;而OsCPK15在所检测的各个组织和时期中表达量均很高。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；ASS基因与GFP的融合蛋白产物在叶片中定位于胞质,在洋葱表皮中定位于胞质和细胞核,白木香原生质体中定位于胞质和质体。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。由稻瘟菌(Magnaporthegrisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因为中心,探讨致病相关基因的种类及其功能,生理小种和致病基因的关系,致病基因的遗传分离和在群体中的转移规律等等,能够为水稻抗瘟性研究和稻瘟病化学防治、生物防治提供理论基础。本研究利用在实验室已经建成的根癌农介导的稻瘟菌T-DNA插入突变体库,挑选了7个致病力缺陷的突变体,提取基因组DNA,PCR检测确认T-DNA的插入。利用DW-ACP-PCR(DNAWalking-AnnealingControlPrimer-PCR)技术对T-DNA右边界侧翼序列进行扩增,7个突变体都获得了特异条带。对这些特异条带进行并测序,其中5个测序成功,另外2个测序失败。大豆花叶病毒病分布非常广泛,是一种世界害,它严重影响大豆产量和外观品质。将成功的序列与稻瘟菌基因组和NCBI数据库比对,发现1个为载体pCAMBIA1300序列,4个与稻瘟菌的基因组相似性达93%～99%,认为是T-DNA插入位点的侧翼序列。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；WRKY转录因子和病程相关蛋白(pathogenesis-relatedproteins,PRs)在植物抗病信号调控途径中起着重要作用。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。是常见的、对人类健康危害比较严重的环境污染物之一,可通过皮肤、呼吸道和消化道等途径进入人体,导致身体组织发生病变,从而引起多种疾病和的发生。因此,毒性研究已经成为大家关注的焦点之一。能抑制细胞分裂,诱导微核形成,导致部分细胞,但的毒性作用机制不是很清楚。酵母具有遗传背景简单,生长周期短等优点,是研究真核生物细胞学机制的模式生物。已有研究证明,可以诱导酵母细胞凋亡,并且伴随着胞内活性氧(ROS)水平的升高,但是关于诱导酵母细胞凋亡的调控机制研究尚处在起步阶段,尤其是动物体内相对保守的凋亡抑制基因BCL-2和CED-9在此过程中的作用尚未见报道。本文以酵母细胞为主要材料,研究了亚诱导细胞的作用机制。主要实验结果如下：浓度为1-7mmol/L的亚可抑制酵母细胞生长,并具有剂量依赖性,其中7mmol/L亚几乎完全抑制了细胞的生长和分裂。亚可诱导酵母细胞,细胞率随处理浓度的升高和作用时间的延长逐渐升高。利用ROS荧光指示剂DCFH-DA,Ca2荧光指示剂Fluo-3AM和NO荧光指示剂DAF-FMDA检测胞内ROS、Ca2和NO水平,发现亚可诱导酵母胞内ROS,Ca2和NO水平显著升高。囚此本研究以刚毛柽柳(Tamarixhispida)的转录因子ThDREB和翻译起始因子TheIFIA两个基因为研究对象,对基因的表达和功能进行了初步研究,以期为抗逆基因工程育种提供理论依据和基因材料。)