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微量吸管使用:1、目的:掌握微量吸管的实验方法。2、原理:挤压乳胶头使微量吸管产生负压而吸取液体。3、实验用品:次性微量吸管、带孔乳胶吸头、试管、2ml吸管、NS等。4、标本:新鲜抗凝l血。5、操作方法:(1)准备吸管将带孔的乳胶吸头套在微量吸管上,连接处应严密不漏气。(2)加稀释液取试管1支,加生理盐水2ml。(3)持管吸血右手拇指和中指夹住吸管及吸头交接处,示指盖住吸头小孔,三个指头轻微用力,排出适量的气体使管内形成较小的负压,将管尖插入抗凝l血(或末梢血),三个指头慢慢松劲,吸取抗凝l血到所需刻度后,抬起示指,注意管尖始终不要离开液面,以免吸入气泡,也不要过度用力将血液吸入乳胶吸头。改良牛鲍计数板的使用:(一)目的:掌握改良牛鲍计数板结构及使用方法。(二)原理:一定倍数稀释的血液或体液混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的改良牛鲍计数板中,在显微镜下对所选择的区域中的细胞进行计数,在乘以稀释倍数,即可换算成单位体积内的细胞数。(三)实验用品:1、器材改良牛鲍计数板、专用盖玻片、光学显微镜、绸布、微量吸管、带孔乳胶吸头、刻度吸管、试管;2、***红细胞稀释液。(四)标本:抗凝l血。[操作方法]1、取红细胞稀释液1.99ml毫升,放入一小试管内。2、用微量吸管吸血至10ul处。3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内,吸上清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。4、用微量吸管或玻棒取混悬液少量,充入计数池内。5、待2-3分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。计数原则:数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。例:红细胞稀释液1.99ml,加血10ul,混匀。充液,静置2~3min,计数***大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞,共600个,则红细胞计数结果:RBC/L=600/5X25X10X200X10^6=6.0X10^12。)
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