在发生“堵”的现象后，就需要找出原因，主要是什么位置发生了“堵”。注意，绝大多数情况下，整个系统只会有一个地方发生堵塞。查堵的方法是从尾向前逆向分段拆开，仔细观察压力数值，如果某一个部件（柱子除外）装上和拆下时的压力差别很大，可发展变化判断。至于柱的堵塞，可以通过换同样规格的柱的压力是否一致来判断。溶剂入口过滤头未经过滤的溶剂或溶剂瓶中生长的微生物都会降低溶剂入口过滤头的寿命,并影响泵性能.一般3个月清洗或更换。将溶剂入口管从过滤头和瓶盖组件处拨下,如果管线中充满溶剂,当过滤头性能良好时,溶剂会自由地从管中滴出．如果堵塞，就没有溶剂或只有很少量的溶剂从管中滴出。如试样在常用溶剂中不溶解，可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。不要使用超声清洗溶剂入口过滤头，否则玻璃颗粒可能是破碎造成堵塞。液相色谱仪与气相色谱仪的区别：1．分析对象的区别GC：适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品；但对高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品，尤其对大多数生化样品不可检测占有机物的20%HPLC：适于溶解后能制成溶液的样品(包括有机介质溶液)，不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测用途广泛，占有机物的80%2．流动相差别的区别GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相有相互作用。HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。液相色谱仪在安装时要考虑到室内的温度和湿度，控制在温度为5--35℃，湿度控制在0--85%的范围内，保持恒温、恒湿。液相色谱仪的***维护与气相色谱仪没有多大区别，液相色谱仪的几个维护***的部件，液相色谱仪的主要部件有色谱柱、进样器、检测器、泵，下面我们分别来说明这几大部件的***维护方面。色谱柱大家都不陌生，是我们做分析的必需品，无论是液相色谱仪还是气相色谱仪都离不开色谱柱。色谱柱是化合物分离的关键，我们在安装时要保证阀件管路的清洁，并且不能碰撞、弯曲或强烈震荡色谱柱，在长期不使用色谱柱的时候要用保存封闭，分析结束后要用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱，流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相，在满足灵敏度的前提下，尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏，要进行净化或提纯处理。进样器是液相色谱仪的主要部分之一，我们也要定期进行维护工作。如果在正常的使用状态下，色谱柱的性能开始下降，基线的信号值会。液相色谱仪的检测器在每次分析完成要立即关闭。泵是液相色谱仪的心脏，我们要定期维护***，这样才能使得其处于状态，能报保证基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳。液相色谱仪的常规操作及维修：1、过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3、打开HPLC工作站，连接好流动相管道，连接检测系统。4、进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5、有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10ml/min。6、调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。7、设计走样方法。点击file，选取se-lectusersandmethods，可以选有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击newmethod。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。更换时注意要将柱塞杆缩至后，松开泵头的两根收紧螺钉，操作时处处以平衡的动作进行，切不可摇动或上下摆动泵头，否则柱塞杆极易折断。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a、进样前的稳流，一般2-5分钟；b、基线归零；c、进样阀的loading-inject转换；d、走样时间，随不同的样品而不同。8、进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击trun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。9、关机时，先关计算机，再关液相色谱。)