武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞***及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE2000)为载体分别以Cθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激...武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。泛素-蛋白酶体通路在植物防卫反应(包括反应)中发挥重要作用,泛素连接酶(ubiquitinligase,E3)则是参与这一过程的重要组分。本研究旨在通过和分析与马铃薯晚疫病抗性相关的泛素连接酶家族中的成员,初步揭示这类***在马铃薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的调控作用,或它们在马铃薯防御晚疫病菌侵染的信号传导网络中的作用,为进一步深入开展抗性机理研究奠定基础。本实验室从晚疫病诱导的马铃薯水平抗性材料构建的cDNA文库中筛选出两个与***r9/Cf-9rapidlyelicitedprotein(ACRE,具有泛素连接酶E3活性)***有很高同源性的EST片段(10-A12和08-E12)。本研究中,我们了这两个EST片段所代表的***,StRFP和StPUB,并研究了其生物学功能。StRFP***的全长cDNA为1354bp,包含一个789bp的开放阅读框(ORF),编码262个氨基酸,含有高度保守的RING-H2型RING指结构域、跨膜结构域和GLD结构域,是一个新的马铃薯ATL(Arabidopsistoxicoparalevadura)蛋白。StRFP***位于马铃薯第3条染色体上,不含内含子。马铃薯***组中可能有1-2个StRFP***拷贝或与之同源性高的***。利用洋葱表皮细胞进行的StRFP-GFP融合蛋白亚细胞***结果显示,StRFP在细胞膜上或膜外表达。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。柑橘童期长达8年以上,严重阻碍了遗传育种进展,因此缩短童期有着十分重要的意义。作为柑橘类落叶果树,枳/早实枳与大多数落叶的草本植物相似,需要经过冬季低温诱导(春化作用)才能开花。FLOWERINGLOCUSC(FLC)是草本植物春化途径关键***。冬性一年生植物在秋季萌发,在冬季前由于FLC高水平表达导致成花受到***,在冬季时由于低温春化作用导致体内FLC的表达量降低,并拥有在春天成花的能力。本实验室前期从枳中分离了FLC同源***PtFLC,发现PtFLC在不同发育时期存在选择性剪切,并分离出了五个转录本,这种调控方式与草本植物不同。为研究PtFLC在枳/早实枳发育中的作用,本研究分别构建了PtFLC四个转录本PtFLCv1、PtFLCv2、PtFLCv3和PtFLCv5的超表达融合载体35S::PtFLC-GUS与35S::PtFLC-EGFP,以期获得带有标记蛋白的转***早实枳,进而对PtFLC功能进行研究。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。以拟南芥金属离子转运体***AtZIP1(GenBank登录号:AAC24197)的氨基酸序列为信息探针,从水稻(OryzasativaL.)中分离得到OsZIP7a和OsZIP8两个锌铁转运体***,OsZIP7a和OsZIP8分别编码384和390个氨基酸残基的产物。OsZIP7a和OsZIP8与ZIP家族成员有着高度的同源性,均包含8个跨膜区,有着高度保守的ZIP结构,在第3和第4跨膜区之间存在一个可变区,可变区富含组氨酸。半定量RT-PCR分析结果表明,OsZIP7a和OsZIP8在水稻根、茎、叶和幼穗等***中均呈低水平表达;在缺铁处理时,OsZIP7a***在水稻幼苗根部的表达量增多,而在地上部的表达未明显增多;在缺锌处理的水稻幼苗中,OsZIP8***的表达量显著增多。构建OsZIP7a::GFP瞬时表达载体,采用农介导法转化洋葱表皮细胞,结果表明,OsZIP7a::GFP***于洋葱表皮细胞的质膜上。构建酵母表达载体pFL61-OsZIP7a和pFL61-OsZIP8,利用醋酸锂方法分别转入酵母双突变株fet3fet4DEY1453和zrt1zrt2ZHY3中,设pFL61空载体为阴性对照,分别在低铁和低锌的酵母YPD培养基中进行酵母功能互补实验。)