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所谓大肠菌群,是指在37℃培养24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革蓝氏阴性无芽孢***的总称。主要由肠***科中四个属内的***组成,即埃希氏***属、柠檬酸***属、克雷伯氏菌属和肠***属。水的大肠菌群数是指100mL水检样内含有的大肠菌群实际数值,以大肠菌群近似数(MPN)表示。在正常情况下,肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽孢***等多种***。这些***都可以随人畜排泄物进入水源,由于大肠菌群在肠道内数量多,所以,水源中大肠菌群的数量,是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。目前,国际上已公认大肠菌群是粪便污染的指标。因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。水中大肠菌群的检测方法,常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于各种水样的检验,但操作繁琐,需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井水,操作简单、快速,但不适用于杂质较多、易于堵塞滤孔的水样。固定底物技术酶底物法(DefinedSubstrateTechnology)采用大肠菌群***能产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培养液呈***,以及大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide)使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理,来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌。固定底物技术酶底物法可以选用国标中推荐粉状培养基(西安立科公司的酶底物***)来进行简便的操作;无需确认试验;固定底物技术酶底物法检测时间短,只需24小时即可同时定量出水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌的MPN值。酶底物法(enzymesubstratetechnique)的原理是:利用大肠菌群***能产生β2半乳糖苷酶(β2D2galactosidase)分解ON2PG(Ortho2nitrophenyl2β2D2galactopyranoside)使培养液呈***,检测水样中是否含有大肠菌群。利用大肠埃希菌产生β2葡萄糖醛酸酶(β2glucuronidase)分解MUG(42methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide)使培养液在波长366nm紫外光下产生蓝色荧光,检测水样中是否含有大肠埃希菌。酶底物法有商品化***供应,实验操作简便,无需确认试验,可同时检测水样中大肠菌群和大肠埃希菌。如果改变培养温度,还可检测耐热大肠菌群。该方法检测周期短,18~24h即可报告结果。可见该方法较大的特点是节省了时间和人力。酶底物法方法灵敏度不同,多管发酵法为每100ml样本中2cfu;酶底物法为每100ml样本中1cfu。方法步骤不同,多管发酵法为多步骤测定,费时费力;酶底物法为一步测定,省时省力。方法耗时不同,多管发酵法对于阴性水样需24h报告结果,对于阳性水样则需72h报告结果;酶底物法无论阴性或阳性水样均可24h报告结果。方法费用不同,多管发酵法可使用半成品培养基或自配培养基,检测成本低廉,目前国内也开发有初发酵试验的成品培养基和一次性耗材,但由于阳性水样必须进行验证试验,从而限制了该商品***的应用推广;酶底物法使用商品***,目前均有国内外生产商供应,该方法在东部经济发达地区使用较广泛。我们国内也逐步完善替代传统方法,酶底物法检测程控定量封口机会越来越受欢迎,用户也越来越多。)
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