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液相色谱仪与气相色谱仪的区别:1.分析对象的区别GC:适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品;但对高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品,尤其对大多数生化样品不可检测占有机物的20%HPLC:适于溶解后能制成溶液的样品(包括有机介质溶液),不受样品挥发性和热稳定性的限制,对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测用途广泛,占有机物的80%2.流动相差别的区别GC:流动相为惰性,气体组分与流动相无亲合作用力,只与固定相有相互作用。HPLC:流动相为液体,流动相与组分间有亲合作用力,能提高柱的选择性、改善分离度,对分离起正向作用。且流动相种类较多,选择余地广,改变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用,当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。另一种不当就是致命的错误:滑丝,这往往是动手能力不太强,螺丝钉很少拧的工作者犯的错误,滑丝的后果不仅是漏液那么简单,常造成重要部件的报废。液相色谱系统的结构及功能说明:液相色谱系统一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统和数据处理与记录系统组成,具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分。其中输液泵、色谱柱和检测器是HPLC仪的关键部分。1、溶剂输送系统:储液器:用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵内。脱气器:脱气的目的是为了防止流动相从色谱柱内流出时释放出气泡进入检测器,从而引起噪声,不能正常检测。输液泵:将储液器中的流动相连续不断地以高压形式进入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。梯度洗脱装置:是在分离过程中通过逐渐改变流动相的组成增加洗脱能力的一种装置。2、进样系统:进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。3、分离系统:色谱柱:对样品进行分离,是整个色谱系统的心脏,它的质量优劣直接影响到分离的效果。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量有限,只适合于实验室应用。4、检测系统:检测器:将色谱柱连续流出的样品组分转变成易于测量的电信号,被数据系统接收,得到样品分离的色谱图。5、数据处理和记录系统:对色谱数据进行处理,并参与HPLC仪器的自动控制。如何预防液相色谱仪液相泵的故障:要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和***的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:1、用高质量***和HPLC级溶剂;2、过滤流动相和溶剂;3、脱气;4、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;5、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;6、定期更换垫圈;1、高惰性超纯中性硅胶制成,每根色谱柱同时提供柱效与填料性能报告。7、需要时加润滑油;8、查阅有关泵操作手册中的其它建议。处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。为了使故障发生后尽除,平时应常备密封、单向阀、泵头装置、各式接头、***丝等部件,以及更换工具。)
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