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对色谱柱升至一恒定温度,通常为其温度上限。初始阶段基线应持续上升,在到达老化温度后5-10分钟开始下降,并且会持续30-90分钟。特殊情况下,可加热至高于使用温度10-20℃左右,但是一定不能超过色谱柱的温度上限,那样极易损坏色谱柱。当到达老化温度后,记录并观察基线。初始阶段基线应持续上升,在到达老化温度后5-10分钟开始下降,并且会持续30-90分钟。当到达一个固定的值后就会稳定下来。如果在2-3小时后基线仍无法稳定或在15-20分钟后仍无明显的下降趋势,那么有可能系统装置有泄漏或者污染。遇到这样的情况,应立即将柱温降到40℃以下,尽快的检查系统并解决相关的问题。如果还是继续的老化,不仅对色谱柱有损坏而且始终得不到正常稳定的基线。柱流失检测在色谱柱老化过程结束后,利用程序升温作一次空白试验(不进样)。这一个部分往往不是有点气泡,而经常是整个管中全是空气而操作人员却浑然不知,以致输送泵工作了半天才发现流动相瓶里的液体一点也没少。一般是以10℃/min从50℃升至使用温度,达到使用温度后保持10min。这样我们就会的到一张流失图。这些数值可能对今后作对比试验和实验问题的解决有帮助。在空白试验的色谱图中,不应该有色谱峰出现。如果出现了色谱峰,通常可能是从进样口带来的污染物。如果在正常的使用状态下,色谱柱的性能开始下降,基线的信号值会。另外,如果在很低的温度下,基线信号值明显的大于初始值,那么有可能是色谱柱和GC系统有污染。其他:色谱柱的保存用进样垫将色谱柱的两端封住,并放回原包装。在安装时要将色谱柱的两端截去一部分,保证没有进样垫的碎屑残留于柱中。注意:当空气中氢气的含量在4-10%时,就有的***。所以一定要保证实验室有良好的通风系统。如何预防液相色谱仪液相泵的故障:要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和***的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:1、用高质量***和HPLC级溶剂;2、过滤流动相和溶剂;3、脱气;4、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;5、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;6、定期更换垫圈;7、需要时加润滑油;8、查阅有关泵操作手册中的其它建议。处理方法比较简单,拧下过滤头在稀中浸泡,超声半小时,洗净后装回去即可。处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。为了使故障发生后尽除,平时应常备密封、单向阀、泵头装置、各式接头、***丝等部件,以及更换工具。)