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如何提取胎牛***白蛋白的!一、所需材料,胎牛***取近郊屠宰场,以柠檬酸三钠为抗凝剂,血液采集后随即分离出血浆备用。需要的***有***白蛋白;xiujia酚氯;醋酸纤维素薄膜,其余***均为分析纯。提取胎牛***白蛋白需要准备LG-6型大容量冷冻离心机,DF-C型电泳仪,UV-754型紫外可见分光光度计,PHS-2型酸度计。二、具体方法,白蛋白含量测定采用xiujia酚氯法,以胎牛***白蛋白为标准.白蛋白纯度的测定采用醋酸纤维素薄膜电泳法。吸光度值的测定用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403nm处的光吸收值,然后折算成浓度为10g/L时牛***白蛋白的光吸收值,用A403表示。使用***细胞培养的操作技巧1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装***至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。2.将***从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。3.一旦在新鲜培养基中添加了***和抗生su时,应该在两到三周内使用它。因为一些抗生su和***中的基本成分在解冻后就开始降解。4.解冻***时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。细胞培养的污染源:***污染:***污染较常见的有大肠gan菌,白色葡萄qiu菌,假单孢菌等。加用kang菌素的培养液可预防和排除个别一般少量***的污染。一旦发生***污染很容易发现,多数情况下培养液短时间内变黄,表明有大量酸性物质产生,出现明显浑浊现象;有时静置的培养液起初不混,但稍加震荡,就有许多混浊物漂起。倒置显微镜下观察,可见培养液中有大量圆球状颗粒物漂浮,有时在细胞表面及周围有大量***存在,细胞停止生长并有中du表现。必要时可取少量培养液涂片染色检查以明确***zhong类;有的培养液改变不明显而有疑似污染,亦可向肉汤培养基内地入少量培养液,37度培养以检测。处理:一般用抗生su的常用量的5~10倍作冲击疗法,用药24~48小时后再换常规培养液,有时在早期污染时此法有效。胎牛***的使用注意事项:1、解冻***时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O。C至4。C至室温),若***解冻时改变的温度太大(如-20。C至37。C),实验显示非常容易产生沉淀物。2、解冻***时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生.3、请勿将***置于37。C太久。若在37。C放置太久,***会变得混浊,同时***中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响***的质量。)
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