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转印电泳转印电泳的分类及注意事项:WesternBlotting(蛋白质单项电泳后印迹转移)EasternBlotting(蛋白质双向电泳后印迹转移)SouthernBlotting(DNA印迹)NorthernBlotting(RNA印迹)在转印过程中要控制温度,在低温或者冷循环条件下进行对于分子量大于100KD的蛋白质大分子不用半干转北京龙方科技***生产、销售电泳槽,以下信息由龙方科技为您提供。蛋白电泳常见问题与解决方法以下信息由北京龙方科技为您提供,龙方电泳伴您成功!蛋白电泳常见问题及解决方法:一,条带出现“微笑”现象(中间凹下两边翘起)主要是凝胶中间部分的凝固不均所致,多出现较厚凝胶中,应待凝胶充分凝固后再做后续操作。二,条带出“皱眉”现象(中间凸起两边下垂)两板之间底部气泡所致,应排除底部气泡。三,Westernblot批发,条带出现“拖尾”现象主要是样品溶解效果不佳;分离胶浓度过大;电泳缓冲液时间过长。建议:加样前离心;选择合适的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;重新配制电泳缓冲液;降低凝胶浓度。四,条带出现纹理现象样品中不溶性颗粒引起的。加样前离心,加适量样品促溶剂。五,指示带已跑出板底,但样品条带还未跑下来与缓冲液和分离胶浓度有关。更换正确PH值的缓冲液,Westernblot,降低凝胶浓度。六,染色背景高,染色过程中***变为蓝色核酸电泳常用染色液1、***化乙锭(ethidiumbromide,EB)较为常用的核酸荧光染料,可嵌入核酸双链的配对碱基之间,在紫外线激发下,发出桔红色荧光。EB-DNA复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。若EB背景太深,可将凝胶浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/LMgCI2中5min,使非结合的EB褪色,这样可检查到10ng的DNA样品,EB也可用于检测单链DNA或RNA,但其对单链核酸的亲和力相对较小,荧光产率也相对较低。2、***橙(acridineorange,AO):***橙可嵌入双链核酸碱基对之间,在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光;还通过静电与单链核酸的磷酸基结合,在254nm紫外线激发下产生640nm的红色荧光。因此可区分单链和双链核酸,Westernblot厂家,灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。但***橙的染色操作要求严格,应在22℃,0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.0)中避光浸泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。3、亚甲蓝(methyleneblue)可将RNA染成蓝色,但灵敏度不高,而且操作时间长。染色过程:胶浸泡于0.02%的亚甲蓝,10mmol/LTris-Ac(pH8.3),4℃放置1~2h,用净水洗5~8h(反复换水),带型肉眼可见,较低检测量为250ng。以上信息由北京龙方科技为您提供!龙方电泳伴您成功!Westernblot-龙方科技公司由北京龙方科技有限公司提供。北京龙方科技有限公司(www.lf-)是一家从事“电泳槽,电泳电源,多板制胶器,凝胶成像”的公司。自成立以来,我们坚持以“诚信为本,稳健经营”的方针,勇于参与市场的良性竞争,使“北京龙方”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务为先,用户至上”的原则,使龙方科技在其它中赢得了众的客户的信任,树立了良好的企业形象。特别说明:本信息的图片和资料仅供参考,欢迎联系我们索取准确的资料,谢谢!)
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