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色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,现代生物企业生产过程中的核心技术之一。他在研究植物叶的色素成分时,将植色谱物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内,然后加入使其自由流下,结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。在分析化学、有机化学、生***学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,终达到分离的效果。色谱理论:保留时间保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间,不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间,因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。保留时间由物质在色谱中的分配系数决定:tR=t0(1KVs/Vm)式中tR表示某物质的保留时间,t0是色谱系统的死时间,即流动相进入色谱柱到流出色谱柱的时间,这个时间由色谱柱的孔隙、流动相的流速等因素决定。K为分配系数,VsVm表示固定相和流动相的体积。这个公式又叫做色谱过程方程,是色谱学基本的公式之一。低压色谱(LPLC)柱压一般低于5bar(或75psi)。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的,长度一般为240-440mm,内径为10-40mm。低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成,可以连续化,实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的,长度一般为240-440mm,内径为10-40mm。对于大多数在紫外区有吸收的物质,光学检测器很常用。填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂,粒径一般为40-60μm。液相色谱仪的***维护与气相色谱仪没有多大区别,液相色谱仪的几个维护***的部件,液相色谱仪的主要部件有色谱柱、进样器、检测器、泵,下面我们分别来说明这几大部件的***维护方面。色谱柱大家都不陌生,是我们做分析的必需品,无论是液相色谱仪还是气相色谱仪都离不开色谱柱。气泡进入阀中会紧贴在阀体的一侧,使球难以返回到阀座,引起倒流,使压力和流速变化范围大,有时甚至为零。色谱柱是化合物分离的关键,我们在安装时要保证阀件管路的清洁,并且不能碰撞、弯曲或强烈震荡色谱柱,在长期不使用色谱柱的时候要用保存封闭,分析结束后要用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱,流动相在使用前必须进行脱气处理,尽量不使用或少使用高粘度的流动相,在满足灵敏度的前提下,尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏,要进行净化或提纯处理。进样器是液相色谱仪的主要部分之一,我们也要定期进行维护工作。液相色谱仪的检测器在每次分析完成要立即关闭。泵是液相色谱仪的心脏,我们要定期维护***,这样才能使得其处于状态,能报保证基线平稳,保留时间重现性好,梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳。液相色谱仪是一种非常***的分析仪器,气主要采用液相色谱法,是一种使用液体当做流动相的色谱仪器,在当今涉及到多个行业领域,液相色谱仪应用范围非常广。液相色谱仪是色谱仪器之一,刚才我们也说到了,它是亿液体为流动相进行分析。与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。液相色谱仪采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。它的主要特点有高速、高压、高灵敏度,液相色谱仪比传统的液相色谱仪速度要快、灵敏度也高、色谱柱可以反复使用、分辨率高等等,所以现在很多都选择液相色谱仪。液相色谱仪的应用范围非常广,现在涉及多个领域,已成为化学、***、工业、农学、商检和法检等科学科领域中重要的分离分析技术。)
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