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大肠菌群检测的关键在于方法的选用,食品中大肠菌群检测有两种表示方法。1、是以100mL(g)检样内大肠菌群较大可能数(MPN)表示,检测方法需使用GB/T4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》;2、以每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值表示,检测方法需使用GB4789.3-2016《食品安全***标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。3、现行食品标准中规定的大肠菌群指标以“CFU/克或CFU/毫升”为单位的,适用GB4789.3-2016,故检测样品前需根据产品标准认真选择方法。例如,GB/T2717-2003酱油卫生标准中对大肠菌群的要求需使用方法一GB/T4789.3-2003。又如GB/T2718-2014酱油卫生标准中对大肠菌群的要求需使用方法二GB4789.3-2016。水中粪大肠菌群的常见检测方法1、聚合酶链式技术提取粪大肠菌群混悬液和待测水样的DNA,利用PCR技术扩增编码约260bp的LacZ***(β-半乳糖苷酶***)和约150BP的UdiA***(β-D-半乳糖苷酶***)的DNA,分别检测大肠菌群数和大肠***。2、荧光原位杂交技术由于粪大肠菌群特异的DNA序列,借助荧光标记的特异寡聚核苷酸片段作为的探针与待测水样中的DNA分子杂交,将杂交细胞经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量分析,确定菌群数。酶底物法(enzymesubstratetechnique)的原理是:利用大肠菌群***能产生β2半乳糖苷酶(β2D2galactosidase)分解ON2PG(Ortho2nitrophenyl2β2D2galactopyranoside)使培养液呈***,检测水样中是否含有大肠菌群。利用大肠埃希菌产生β2葡萄糖醛酸酶(β2glucuronidase)分解MUG(42methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide)使培养液在波长366nm紫外光下产生蓝色荧光,检测水样中是否含有大肠埃希菌。酶底物法有商品化***供应,实验操作简便,无需确认试验,可同时检测水样中大肠菌群和大肠埃希菌。如果改变培养温度,还可检测耐热大肠菌群。该方法检测周期短,18~24h即可报告结果。可见该方法较大的特点是节省了时间和人力。)
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