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层析根据固定相与溶质(试料)间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型(离子交换层析)等三种类型。但这并不是很严格的,有时常见到其中间类型。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如和水的混合物。此外,近来也应用亲和层析,即将与基质类似的化合物(通常为共价键)结合到固定相上,再利用其特异的亲和性沉淀与其对应的特定的酶或蛋白质。按层析的机理划分:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。吸附层析:利用吸附剂表面对不同组分吸附性能的差异,达到分离鉴定的目的。分配层析:利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数不同,使之分离。离子交换层析:利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同。因此选择层析固定相支持物的粒度、均匀度等物理性能,流动相的层析系统和温度等都是做好层析的关键。凝胶层析:利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。纸层析是层析法的一种,要了解纸层法还得从层析法开始.层析法又称色层分析法或色谱法(Chromatography),是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。例如:我们利用物质在溶解度、吸附能力、立体化学特性及分子的大小、带电情况及离子交换、亲和力的大小及特异的生物学反应等方面的差异,使其在流动相与固定相之间的分配系数(或称分配常数)不同,达到彼此分离的目的。带阳离子基团的,如磺酸基(—SO3H)、羧(—CH2COOH)和磷酸基等为阳离子交换剂。超高1效液相色谱法的原理与高1效液相色谱法基本相同,所改变的地方有以下几点:小颗粒、微粒固定相的出现。高1效液相色谱的色谱柱,例如常见的十八***硅胶键合柱,它的粒径是5um,而超高1效液相色谱的色谱柱,会达到3.5um,甚至1.7um。这样的孔径更加利于物质分离(2)超高压输液泵的使用。由于使用的色谱柱粒径减小,使用时所产生的压力也自然成倍增大。故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。(3)高速采样速度的灵敏检测器。(4)使用低扩散、低交叉污染自动进样器。层析根据固定相与溶质(试料)间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型(离子交换层析)等三种类型。配备了针内进样探头和压力辅助进样技术;(5)仪器整体系统优化设计。色谱工作站配备了多种软件平台,实现超高1效液相分析方法与高1效液相分析方法的自动转换。)
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