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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。:研究MAGI3对细胞黏附连接关键蛋白E-cadherin翻译后修饰及其对β-catenin在细胞内分布的影响,为探讨MAGI3通过调控细胞黏附连接影响侵袭、转移的可能机制提供线索。方法首先采用Western印迹方法检测过表达MAGI3后E-cadherin蛋白表达条带的迁移变化,...构建了植物表达载体pBRSAg,该载体具有完整的植物表达元件,CaMV35S启动子、农T-DNA左右边界、植物报告***gus和植物选择标记***hpt,适用于农的转化;通过冻融法将重组质粒pBRSAg转入根***农LBA4404中,利用农介导法转化叶盘,经筛选培养获得植株。抗性植株经GUS染色和PCR检测为阳性,初步表明表面抗原***在中得到表达。选取含有氯嘧磺隆抗性标记的ILV1***和报告***GFP二元载体的农AGL-1,采用单因子和双因子方法研究根***农AGL-1介导柱花草菌CH008转化过程中各主要因素对转化率的影响,优化构建ATMT转化柱花草胶孢菌体系条件,使转化效率达到300~400个转化子/106个孢子,即根***农AGL-1浓度OD600=0.8,菌分生孢子浓度为1×106个/mL,AS浓度为100μmol/L,诱导时间为6h,共培养温度和时间分别为25℃和4d。经PCR检测都有GFP片段,并能够表达绿色荧光蛋白。这为进一步开展菌对柱花草的致病机理研究提供了依据,优化转化体系有利于后续突变体库的扩大、筛选突变体和致病功能***的研究。)
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