武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。1、染色过强原因解决办法抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长降低抗1体滴度（一般指浓缩性抗1体）抗1体孵育时间：室温1小时或4℃过夜孵育温度过高，孵育温度超过37℃一般室温20-28℃DAB显色时间过长或DAB浓度过高显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准2、非特异性背景染色原因解决办法操作过程中冲洗不充分每步冲洗3×5***中含过氧化物酶未阻断可再配置新鲜3%H2O2封闭，孵育时间延长***中含内源性生物素正常非***动物血1清再封闭血1清蛋白封闭不充分延长血1清蛋白封闭时间3、染色弱原因解决办法抗1体浓度过低，孵育时间过短提高抗1体浓度，孵育时间不能少于60分钟***超过有效使用期及时更换***操作中，滴加***时缓冲液未沥干，致使***稀释每步滴加***前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥）室温太低，低于15℃若室温低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟（或4℃冰箱过夜）蛋白封闭过度封闭时间不要超过10分钟4、染色阴性原因解决办法操作步骤错误重新试验，设立阳性对照***中无抗原设立阳性对照片，以验证实验结果一抗与二抗种属连接错误仔细确定一抗与二抗种属无误机体被微生物感1染后，先产生IgM抗1体，然后产生IgG抗1体。经过一段时间，IgM抗1体量逐渐减少而消失，而IgG抗1体可长期存在，在***痊愈后可持续数年之久。IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定，对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。1.3抗原抗1体反应1.3.1可逆性抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：AgAb→Ag·Ab抗1体的亲和力（affinity）是抗原抗1体间的固有结合力，可以用平衡常数K表示：K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性，因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。2005年欧洲和美国的指南，均进一步肯定了脑钠肽在心衰诊断中的作用。在抗血1清中，特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体，称为亲和层析纯抗1体，应用于***测定中可得到更好的效果。)