武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。通过比较不同侵染液浓度、侵染时间、取材部位、预处理等条件下的转化效果,优化了农介导的洋葱鳞茎内表皮细胞转化系统,并且成功检测到大蕉ASR蛋白(MpASR)与GFP的融合蛋白在洋葱表皮细胞中的分布。植物中,WRKY转录因子家族成员众多,近年来成为植物分子生物学研究的热点。由于其编码蛋白的N-端具有高度保守的WRKYGQK氨基酸残基序列,人们将其命名为WRKY。其保守的WRKY结构域能与下游基因启动子W-box特异性结合,从而调控下游基因的表达水平。目前,诸多研究结果表明,WRKY转录因子在植物中参与生物胁迫、非生物胁迫、种子发育、种子休眠与萌芽、形态建成、衰老等方面的表达调控。前人研究表明,拟南芥转录因子AtWRKY70的表达水平受水杨酸诱导,与该信号途径当中的抗病反应相关联。与野生型相比,超量表达AtWRKY70的拟南芥植株对青花菜褐茎病(Hyaloperonosporaparasitica)、假单胞菌(Pseudomonassyringae)等真菌病表现出了更强的抗性,而对欧文氏软腐菌(Erwiniaamylovora)等细菌病则更敏感。同时发现,AtWRKY70对植物的衰老起负调控作用。序列对比分析表明,在杨树当中,PtWRKY89与AtWRKY70高度同源,然而,对于PtWRKY89生物学功能的研究至今尚未报道。本中,我们首先了PtWRKY89基因,并对其进行了组织表达分析及亚细胞定位,进一步构建载体转化毛白杨,在转基因植株中分析了该转录因子在病害胁迫生理过程中的调控作用。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。本研究旨在通过对根癌农侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰类化合物诱导元件的具体位置。在本研究中采用根癌农(Agrobacteriumtumefaciens)侵染洋葱(Alliumcepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响。结果显示,在OD600值为0.8的农液中15min,共培养3d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰类化合物诱导元件位于ATG上游-220～-143bp之间。结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析。)