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骨质疏松是一种以单位体积内骨***量减少为特点的代谢性骨病变,以骨形成(成骨)弱于骨吸收(破骨)作用所致。患者持续伴有骨骼疼痛、易gu折等特征,严重影响生活质量,而绝经后女性是骨质疏松的高危人群。jia状旁腺素(parathyroidhormone,PTH)类似物是临床上用于靶向成骨细胞(osteoblast)zhi疗I型、II型骨质疏松、雌***缺乏的年轻女性和糖皮质***所致的骨质疏松症的主要药。但是,***类药仍然存在靶向不特意、***能生物放大和***间相互拮抗等缺点。因此,研究人员也在寻找新型骨合成代谢制剂,替代受给药***大疗程限制的***依赖类药。***分子的水解片段,在一定条件下,Ig分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。木瓜蛋白酶和胃蛋白酶(pepsin)是常用的两种Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的结构和功能,分离和纯化特定的12多肽片段。木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在铰链区二硫键连接的两条重链的近N端,可将Ig裂解为两个完全相同的Fab段和一个Fc段。Fab段即抗原结合片段(fragmentantigenbinding,Fab),由一条完整的轻链与重链的VH和CHl结构域组成。一个Fab片段为单价,可与抗原结合但不产生凝集反应或沉淀反应;Fc段即可结晶片段(fragmentcrystallizable,Fc),由Ig的CH2和CH3结构域组成。Fc段无抗原结合活性,是Ig与效应分子或细胞相互作用的部位.为了使细胞适应无***培养,关键的是使所培养细胞:1.处于对数生长中期,2.gt;90%活xi胞率,3.适应时以较高的起始细胞接种,细胞适应无***培养基的方法:1.直接适应——细胞从添加***的培养基转换到无***培养基(SFM)中。一些类型细胞可直接从包含***的培养基适应无***培养基。对于直接适应,接种细胞密度应该:2.5×10~3.5×10细胞/ml。当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时,传代培养细胞。当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时,细胞完全适应了无***培养基。每隔3~5天,当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无***培养基的细胞培养物应该再次传代培养。)