武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞***,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞***研究中的优劣。方法从白木香愈伤***中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS***,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP2种植物表达载体,分别利用根***农侵染叶片、***枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞***。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS***与GFP的融合蛋白产物在叶片中***于胞质,在洋葱表皮中***于胞质和细胞核,白木香原生质体中***于胞质和质体。结论ASS***在白木香原生质体胞质及质体***;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞***可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内***对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种GFP标签蛋白质表达载体,分别在GFP的N和C端预留位点,以目的***。利用该***载体,分别内切酶FokI的切割结构域与MS2噬菌体外壳蛋白MCP的串联蛋白（FokI：MCP：FokI,FMF）至GFP的N和C端,得到FMF与GFP的融合蛋白GFP：FMF和FMF：GFP,其中FMF的N端带有细胞核***信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察GFP荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的***和GFP的表达载体pER35GFP-FMF和pER35FMF-GFP。激光共聚焦结果显示侵染了只含GFP载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到GFP的绿色荧光,而侵染了含核***信号FMF：GFP和GFP：FMF2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞***,具有简单、***和通用性的特点。泛素-蛋白酶体通路在植物防卫反应(包括反应)中发挥重要作用,泛素连接酶(ubiquitinligase,E3)则是参与这一过程的重要组分。本研究旨在通过和分析与马铃薯晚疫病抗性相关的泛素连接酶家族中的成员,初步揭示这类***在马铃薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的调控作用,或它们在马铃薯防御晚疫病菌侵染的信号传导网络中的作用,为进一步深入开展抗性机理研究奠定基础。本实验室从晚疫病诱导的马铃薯水平抗性材料构建的cDNA文库中筛选出两个与***r9/Cf-9rapidlyelicitedprotein(ACRE,具有泛素连接酶E3活性)***有很高同源性的EST片段(10-A12和08-E12)。本研究中,我们了这两个EST片段所代表的***,StRFP和StPUB,并研究了其生物学功能。StRFP***的全长cDNA为1354bp,包含一个789bp的开放阅读框(ORF),编码262个氨基酸,含有高度保守的RING-H2型RING指结构域、跨膜结构域和GLD结构域,是一个新的马铃薯ATL(Arabidopsistoxicoparalevadura)蛋白。StRFP***位于马铃薯第3条染色体上,不含内含子。马铃薯***组中可能有1-2个StRFP***拷贝或与之同源性高的***。利用洋葱表皮细胞进行的StRFP-GFP融合蛋白亚细胞***结果显示,StRFP在细胞膜上或膜外表达。)