免yi共沉淀（Co-IP检测）是以抗ti和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的方法。当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质与蛋白质间的相互作用也被保留下来。用预先固化在beads上的蛋白质A的抗ti免yi沉淀A蛋白，实时荧光定量pcr，那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来，荧光定量pcr，再通过蛋白变性分离，pcr检测，对B蛋白进行检测，进而证明两者间的相互作用。蛋白质双向电泳实验流程1.三氯yi酸-bing酮沉淀法提取蛋白2.双向电泳分离待测样品(1)一相等电聚焦前处理按照所用仪器的厂商提供操作手册进行。蛋白质上样浓度不要超过10mg/mL，否则会造成蛋白质的聚集或沉淀。(2)等电聚焦完毕后(约需24hr），若不立即进行第二相电泳，胶条可夹在两层塑料薄膜中于-70℃保存数月。(3)等电聚焦好的胶条按厂商提供的操作手册平衡两次。平衡完毕后，于电泳仪上用12.5%SDS-PAGE凝胶进行电泳分离。仪器设置为2.5W/胶45min，15W/胶5-8hr，20℃。3.银染法对凝胶进行染色(1)固定(2)清洗(3)增敏(4)清洗(5)染色(6)清洗(7)显影(8)定影(9)水洗3.凝胶扫描及图像分析(1)图像扫描：凝胶染色后采用Imagescanner以300dpi，16-bit模式（65536灰阶）进行扫描。(2)图像分析：扫描完毕后，凝胶继续置于1%yi酸中于4℃保存。扫描后的图像用ImageMaster2DPlatinumsoftware软件进行分析。分析按照软件厂商提供的说明书进行。以***小点面积30，平滑度2为主要参数***大限度检测蛋白质点。以目标蛋白质3个重复具有相同趋势，目标蛋白质相邻位点的相对一致性，至少2个重复有2倍以上差异作为判定差异表达蛋白质的标准。转录组测序转录组即某个物种或特定细胞在某一功能状态下产生的RNA的总和，商洛pcr，是研究细胞表型和功能的一个重要手段。与***组不同的是，转录组的定义中包含了时间和空间的限定。同一细胞在不同的生长时期及生长环境下，其***表达情况是不相同的。转录组测序（RNA-Seq）是指利用第二代高通量测序技术进行cDNA测序，快速地获取某一物种特定qi官或***在某一状态下的转录本。相对于传统芯片而言，RNA-Seq无需预先设计探针，即可对物种的细胞类型的转录组进行检测，能够提供较的数字化信号，更高的检测通量以及更广泛的检测范围，是目前深入研究转录组复杂性的良好工具。pcr检测-英瀚斯(在线咨询)-商洛pcr由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司实力不俗，信誉可靠，在江苏南京的技术合作等行业积累了大批忠诚的客户。英瀚斯带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！)