注意事项1.针头大小与动物的种类有关，t同时针头一定要磨钝。2.检查灌注泵的运作情况，一定排出管子的气泡和空气，防止空气栓塞。3.经腹腔暴腔，先清楚升主动脉外面的脂肪***和心外膜***。4.将针头经左心室插入升主动脉（颜色变白的哦），并用钳子固定。5.解开右心耳，同时开启灌注泵。注意，不要随便揭开心脏的其他部位，否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功，尤其。6.将4度的生理盐水（好已动物的发白为标准，我们实验室的大鼠约用250ml）和多聚甲醛(根据所取得材料而定)依次灌入。7.整个过程均应将动物放在冰上，动物实验室，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。难点与关键点将灌注针插入主动脉内是灌注固定的关键，也是难点。首先准确找到主动脉，动物实验外包，这是此步骤的要点。可用温生理盐水将胸腔内的血液冲洗干净，用镊子轻轻夹住心外膜（夹的越少越好，以免影响取材）将心脏向左上方提起，即可看清主动脉，又可使灌注针很容易地插入主动脉内。插入时动作要慢，针尖方向不要偏向右侧，以免刺入右心房，如果感到有阻力，则将针退后、调整方向重新进针，直到进入主动脉，灌注针进入主动脉后可在心脏的上方看到其位置，灌注针进入主动脉的长度好为3~5毫米，然后用丝线扎紧。切勿将灌注针放在左心室内，这样由于主动脉瓣的关闭，灌注液很难进入主动脉，而是沿着心室的切口流出，致使灌注失败。另外，灌注针插入成功后，一定要用剪刀剪开右心耳而不是右心室，这是灌流液的出口。剪开心尖的位置一定要掌握好，动物实验，不能偏右使灌注针插入右心室。2.2旋转圆筒睡眠剥夺法此方法于1979年先应用于睡眠剥夺实验中，设备主要由一柱形圆筒及一小型慢速马达构成。圆筒直径30cm，可以做动物实验的公司，高30cm。圆筒底由PVC(聚)构成，侧壁由直径为10.4mm的PVC杆围成。杆长度30cm，杆之间间隔15.5mm，圆筒与小型马达相连。马达转速为每45s转1圈(也有学者应用每min转1圈)。至少在实验前2d每天将大鼠放入圆筒中适应环境1次，适应时间不少于3h。实验时将马达按45s每1圈进行匀速转动，通过圆筒的转动带动大鼠不停运动而达到睡眠剥夺的目的。此类方法简单易行，睡眠剥夺效果明显。缺点是长时间不停运动可引起机体的运动后应激反应及身体疲劳，可能干扰睡眠剥夺实验结果!此类方法发展出多种变化，有实验者在进行新生大鼠睡眠剥夺时将筒旋转速调节至2~3r/min后期逐渐增加至6~7r/min。动物实验室-动物实验-英瀚斯生物科技公司由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司位于江苏省南京市栖霞区和燕路371号东南大学***大学科技园科创楼A301。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前英瀚斯在技术合作中享有良好的声誉。英瀚斯取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。英瀚斯全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)